導(dǎo)語：如何才能寫好一篇生物學(xué)論文，這就需要搜集整理更多的資料和文獻(xiàn)，歡迎閱讀由公文云整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

模型建構(gòu)是一種重要的科學(xué)方法，也是生物學(xué)課程標(biāo)準(zhǔn)所重視的一種能力。高中生物學(xué)教材含有豐富的模型建構(gòu)案例，是試題原創(chuàng)的重要素材庫。模型分為三種類型，即物理模型、概念模型、數(shù)學(xué)模型。物理模型如細(xì)胞膜的流動(dòng)鑲嵌模型、DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型;概念模型如血糖平衡調(diào)節(jié)模型、達(dá)爾文的自然選擇學(xué)說的解釋模型等;數(shù)學(xué)模型如自由組合定律、有絲分裂中DNA含量變化曲線等。在原創(chuàng)試題的命制中，對(duì)核心概念的考查，可在物理模型、概念模型、數(shù)學(xué)模型之間進(jìn)行轉(zhuǎn)換，從而創(chuàng)設(shè)出新穎的問題情景。例1:圖示某反應(yīng)物分子從常態(tài)到顯著活躍狀態(tài)能量變化的一段曲線。①②③三條曲線表示加酶、常溫和加氯化鐵等條件下的反應(yīng)。下列敘述正確的是A．E1表示酶所降低的反應(yīng)活化能B．E2表示氯化鐵所降低的反應(yīng)活化能C．曲線①與曲線③的對(duì)比，說明酶具有高效性D．曲線①與曲線②的對(duì)比，說明加氯化鐵能加快反應(yīng)速率例1是以“酶的作用及其原理”為考查內(nèi)容的試題。命制時(shí)，將“概念模型”轉(zhuǎn)換成“數(shù)學(xué)模型”，用數(shù)學(xué)中的坐標(biāo)曲線圖進(jìn)行情景設(shè)計(jì)。該曲線圖的設(shè)計(jì)創(chuàng)意來自大學(xué)教材陳閱增《普通生物學(xué)》第2版第46頁上的插圖，但經(jīng)過較大的改進(jìn)，在圖中增加了有效信息，去除了一些干擾信息。題目情景新穎，又重點(diǎn)考查了“活化能”概念中之“顯著活躍狀態(tài)與常態(tài)下分子能量的差值”這一要素。參考答案:D。例2:圖示為研究滲透作用的實(shí)驗(yàn)裝置，請(qǐng)回答下列問題:(1)漏斗內(nèi)溶液(S1)和漏斗外溶液(S2)為兩種不同濃度的蔗糖溶液，漏斗內(nèi)外起始液面一致。滲透平衡時(shí)的液面差為h，此時(shí)S1和S2濃度大小關(guān)系為。(2)圖中半透膜模擬的是成熟植物細(xì)胞中的，兩者在物質(zhì)透過功能上的差異是。(3)為進(jìn)一步探究?jī)煞N膜的特性，某興趣小組做了以下實(shí)驗(yàn)……(以下部分略)例題2是2013年江蘇高考生物學(xué)試題的第27題，就是這種原創(chuàng)策略的成功案例。“滲透作用原理”是考綱中“物質(zhì)出入細(xì)胞的方式”這一考點(diǎn)的重點(diǎn)內(nèi)容之一。在命題時(shí)，將概念模型轉(zhuǎn)換成物理模型，即將滲透作用的內(nèi)涵和外延分解開來，將滲透裝置示意圖這一物理模型作為滲透作用概念外延的一部分。用數(shù)學(xué)方法處理實(shí)驗(yàn)結(jié)果(如液面高度差h、S1和S2溶液的濃度關(guān)系)，通過考查學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)宏觀現(xiàn)象的認(rèn)知來考查對(duì)滲透作用微觀原理的認(rèn)知，通過考查對(duì)概念外延的認(rèn)知來考查對(duì)概念內(nèi)涵的認(rèn)知。參考答案:(1)S1＞S2(2)原生質(zhì)層原生質(zhì)層能主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)有關(guān)物質(zhì)而半透膜不能。

2“知識(shí)與方法”考查的“重組移植”策略

生物學(xué)試題考查的知識(shí)內(nèi)容主要包括事實(shí)性知識(shí)和方法性知識(shí)?？疾闀r(shí)，整合事實(shí)性知識(shí)和方法性知識(shí)可以還原知識(shí)的產(chǎn)生過程、體現(xiàn)知識(shí)的應(yīng)用價(jià)值。從知識(shí)的形成過程提煉出的科學(xué)方法，還可以“移植”到其他知識(shí)的探究過程。生物學(xué)原創(chuàng)試題采用這種思路，重組“知識(shí)”和“方法”，可創(chuàng)設(shè)出新穎的問題情景。例如，差速離心法是分離各種細(xì)胞器的方法。設(shè)計(jì)“酵母菌細(xì)胞呼吸”有關(guān)試題時(shí)，可將差速離心法“移植”到酵母菌細(xì)胞呼吸的研究中。即用差速離心法將線粒體和細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)分離，然后進(jìn)行細(xì)胞呼吸的實(shí)驗(yàn)，以此作為試題情景，以考查細(xì)胞呼吸的過程。又如，將放射性同位素標(biāo)記法“移植”到考查細(xì)胞周期染色體行為的試題中，創(chuàng)設(shè)出來的試題既能夠考查有絲分裂細(xì)胞中染色體的行為，又能夠考查DNA半保留復(fù)制的特點(diǎn)。例3就是這樣的試題。例3:提取正常家兔的造血干細(xì)胞，放入液體培養(yǎng)基培養(yǎng)，提供的脫氧核苷酸原料中的N元素全為15N。造血干細(xì)胞連續(xù)進(jìn)行有絲分裂，則第二次分裂后期的細(xì)胞中，含14N的染色體所占比例為A．0B．50%C．25%D．100%參考答案:B。

3從科學(xué)史資料提煉試題的“補(bǔ)充整合”策略

高中生物學(xué)教材含有豐富的科學(xué)史素材，是命題的重要素材庫。若能根據(jù)知識(shí)的生成過程，梳理史實(shí)的脈絡(luò)，挖掘史料之間的內(nèi)在聯(lián)系，以思維能力和核心知識(shí)為測(cè)量目標(biāo)和考查內(nèi)容，做好“補(bǔ)充整合”，命題往往能夠打破框框、達(dá)到求變出新的效果。這一策略的要點(diǎn):第一，要對(duì)史料進(jìn)行針對(duì)性的“補(bǔ)充”，才能出新;第二，須“整合”，形成一個(gè)有內(nèi)在聯(lián)系的知識(shí)結(jié)構(gòu)，思路才會(huì)連貫，主題才能聚焦。2014年高考理綜試題福建卷的第28題，就是采用這種策略命制的。從例4可以看出，該題對(duì)教材中的科學(xué)史素材有選擇、有提煉，以“人類對(duì)遺傳的認(rèn)知逐步深入”為線索，主題聚焦，第1小題和第3小題對(duì)教材中的史料有補(bǔ)充和整合，設(shè)問的角度也比較新穎。這道題的出現(xiàn)，是福建高考遺傳方面命題的一個(gè)新突破，它避開了以往的舊模式，打開一片新的視野。盡管題干文字較長(zhǎng)、語言表達(dá)還存在一定的瑕疵。但是，其靈活的創(chuàng)作思路和求新求變的可貴精神值得贊賞。例4:人類對(duì)遺傳的認(rèn)知逐步深入。(1)在孟德爾豌豆雜交實(shí)驗(yàn)中，純合的黃色圓粒(YYRR)與綠色皺粒(yyrr)的豌豆雜交，若將F2中黃色皺粒豌豆自交，其子代中表現(xiàn)型為綠色皺粒的個(gè)體占。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)r基因的堿基序列比R基因多了800個(gè)堿基對(duì)，但r基因編碼的蛋白質(zhì)(無酶活性)比R基因編碼的淀粉支酶少了末端61個(gè)氨基酸，推測(cè)r基因轉(zhuǎn)錄的mRNA提前出現(xiàn)。試從基因表達(dá)的角度，解釋在孟德爾“一對(duì)相對(duì)性狀的雜交實(shí)驗(yàn)”中，所觀察的7種性狀的F1中顯性性狀得以體現(xiàn)，隱性性狀不體現(xiàn)的原因是。(2)摩爾根用灰身長(zhǎng)翅(BBVV)與黑身殘翅(bbvv)的果蠅雜交，將F1中雌果蠅與黑身殘翅雄果蠅進(jìn)行測(cè)交，子代出現(xiàn)四種表現(xiàn)型，比例不為1∶1∶1∶1，說明F1中雌果蠅產(chǎn)生了種配子。實(shí)驗(yàn)結(jié)果不符合自由組合定律，原因是這兩對(duì)等位基因不滿足該定律“”這一基本條件。(3)格里菲思用于轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的肺炎雙球菌中，S型菌有SⅠ、SⅡ、SⅢ等多種類型，R型菌是由SⅡ型突變產(chǎn)生。利用加熱殺死的SⅢ與R型菌混合培養(yǎng)，出現(xiàn)了S型菌。有人認(rèn)為S型菌出現(xiàn)是由于R型菌突變產(chǎn)生，但該實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的S型菌全為，否定了這種說法。(4)沃森和克里克構(gòu)建了DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型，該模型用解釋DNA分子的多樣性，此外，的高度精確性保證了DNA遺傳信息穩(wěn)定傳遞。參考答案:(1)1/6終止密碼(子)顯性基因表達(dá)，隱性基因不轉(zhuǎn)錄，或隱性基因不翻譯，或隱性基因編碼的蛋白質(zhì)無活性或活性低(2)4非同源染色體上非等位基因(3)SⅢ(4)堿基對(duì)排列順序的多樣性堿基互補(bǔ)配對(duì)。

4基于科技論文原創(chuàng)試題的“挖掘轉(zhuǎn)化”策略

篇2

1.1實(shí)驗(yàn)方法

1.1.1病原菌的分離和致病性測(cè)定采集新近腐爛的百合鱗莖，采用組織分離法[11]在病健交界組織處切取4mm×4mm小塊，用75％酒精表面消毒30s，再用2%次氯酸鈉消毒7min，無菌水沖洗3次，然后置于PDA培養(yǎng)基上28℃黑暗培養(yǎng)，待長(zhǎng)出菌絲后，挑取菌落邊緣進(jìn)行純化，純化后的菌落再進(jìn)行單孢分離培養(yǎng)。病原菌致病性測(cè)定根據(jù)柯赫氏法則，用滅菌的接種針在消毒后的鱗莖片上刺孔，將浸有菌液的濾紙片貼在孔上作為有傷接種，同時(shí)將浸有菌液的濾紙片貼在未刺孔的鱗莖片上作為無傷接種，將浸無菌水的濾紙片貼在孔上作為對(duì)照。接種處理完成后將鱗莖片置于培養(yǎng)皿中保濕培養(yǎng)，5d后觀察并記錄發(fā)病情況，確定病原菌對(duì)百合鱗莖的致病性。對(duì)接種發(fā)病的鱗莖片再次進(jìn)行病原菌的分離。

1.1.2病原菌鑒定

1.1.2.1病原菌形態(tài)學(xué)觀察將病原菌接種到PDA平板，28℃黑暗培養(yǎng)2-5d，觀察菌落形態(tài)，并在顯微鏡下觀察病原菌的菌絲及孢子的形態(tài)特征，測(cè)量孢子大小。

1.1.2.2ITS序列分析將供試菌株接種于PDA培養(yǎng)基中；28℃恒溫培養(yǎng)4d，收集菌絲體，采用CTAB法提取病原菌基因組DNA。ITS通用擴(kuò)增引物為TS1（5’-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’）和TS4（5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’）。擴(kuò)增體系：50µL，基因組模板DNA1µL、10µmol/L上下游引物各1µL、2mmol/LdNTPs5µL、KODDNA聚合酶1µL、10×KODbuffer5µL，加ddH2O補(bǔ)足體積。PCR擴(kuò)增反應(yīng)程序?yàn)?4℃預(yù)變性3min；94℃變性30s；58℃復(fù)性30s；72℃延伸3min，35個(gè)循環(huán)；72℃延伸10min。擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)后，由北京信諾金達(dá)生物技術(shù)有限公司測(cè)序。所得測(cè)序結(jié)果在NCBI網(wǎng)站上用BLAST軟件進(jìn)行同源性比較后，下載同源序列，用MEGA（molecularevolutionarygeneticsanalysis，Version6.0）軟件將病原菌ITS序列與同源序列進(jìn)行比對(duì)，并采用鄰接法（Neighborjoining，NJ）構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹，自舉法（bootstrap）對(duì)系統(tǒng)發(fā)育樹進(jìn)行檢驗(yàn)，500次重復(fù)。

1.1.3病原菌生物學(xué)特性將直徑5mm的病原菌菌塊分別接種于供試培養(yǎng)基平板（直徑9cm）中央，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，分析培養(yǎng)基種類、碳源、氮源、溫度、pH和光照時(shí)間對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量的影響。采用PDA、PSA、PMA、LA和LDA培養(yǎng)基；培養(yǎng)溫度分別為5、15、25和35℃；pH分別為5、6、7、8和9；全光照、全黑暗和光照/黑暗各12h；等量葡萄糖、果糖、乳糖和淀粉置換查氏基本培養(yǎng)基中的蔗糖，等量硫酸銨、硝酸銨、硝酸鉀和蛋白胨，置換查氏基本培養(yǎng)基中的硝酸鈉，并設(shè)空白對(duì)照。病原菌菌株Z1和Z2分別在以上各條件下培養(yǎng)5d、2d后（因菌株Z2生長(zhǎng)速度較快，因此縮短培養(yǎng)時(shí)間統(tǒng)計(jì)菌落生長(zhǎng)狀況），采用十字交叉法測(cè)量菌落生長(zhǎng)直徑作為菌絲生長(zhǎng)狀況指標(biāo)，7d后采用血球計(jì)數(shù)板法測(cè)量孢子產(chǎn)量。

1.2數(shù)據(jù)分析

采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析，Duncan氏新復(fù)極差法檢驗(yàn)處理間差異顯著性。顯著水平p=0.05，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)。

2結(jié)果與分析

2.1百合鱗莖腐爛病癥狀及致病性蘭州百合鱗莖腐爛病的發(fā)生一般從鱗莖表面破損處開始，初侵染時(shí)在破損處形成略顯褐色的侵染點(diǎn)，逐漸擴(kuò)展形成近圓形或不規(guī)則形狀的褐色病斑，病斑中央呈腐爛狀，并逐漸向四周擴(kuò)大，病斑上可見灰綠色霉層，腐爛組織不斷增加，嚴(yán)重時(shí)導(dǎo)致整個(gè)鱗莖軟化腐爛。從蘭州百合鱗莖腐爛病斑上分離純化得到五株菌株，分別編號(hào)為Z1、Z2、Z3、Z4和Z5。致病性結(jié)果表明，僅菌株Z1、Z2單獨(dú)接種健康百合鱗莖片后，在接種部位出現(xiàn)腐爛病斑，并伴隨菌絲體大量繁殖，菌株Z2比Z1的侵染能力強(qiáng)，無傷接種也可導(dǎo)致鱗莖片腐爛（圖1-b、c）。菌株Z1和Z2混合接種鱗莖片后，使鱗莖片腐爛更為嚴(yán)重（圖1-d），其病癥與百合鱗莖自然條件下的發(fā)病癥狀相同。從接種發(fā)病部位可分別重新分離到與接種菌相同的菌株，表明所分離到的菌株Z1、Z2均為蘭州百合鱗莖腐爛病病原菌。

2.2病原菌鑒定

2.2.1病原菌形態(tài)從蘭州百合腐爛鱗莖上分離到的病原菌菌株Z1，在PDA培養(yǎng)基上菌絲質(zhì)地致密絲絨狀，中央部分呈絮狀，菌株形成少量菌核，同時(shí)伴有滲出液（圖2-a）；菌落反面為無色至淡褐色，后期產(chǎn)生菌核時(shí)，會(huì)顯現(xiàn)黑褐色斑點(diǎn)（圖2-b）；分生孢子頭初為球形，后呈輻射形；分生孢子梗多生自基質(zhì)，孢子梗200~800μm×8~20μm，壁厚，無色，粗糙；產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)為雙層；分生孢子為近球形，直徑為2.4~6.4μm，壁略粗糙（圖2-c）。病原菌菌株Z2在PDA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)迅速，菌絲疏松，最初呈白色，后變?yōu)榛液谏▓D2-d），菌落背面呈白色棉絮狀（圖2-e）；假根發(fā)達(dá)，分枝呈指狀或根狀，呈深褐色。孢子囊呈球形或近球形，初期呈白色，老后呈黑色，直徑25~200μm，孢囊孢子呈橢圓形或近球形，淡褐色（圖2-f）。

2.2.2ITS序列分析用ITS通用引物擴(kuò)增出病原菌的通用引物序列，長(zhǎng)度分別為594bp（GenBank登錄號(hào)：KP172534）和627bp（GenBank登錄號(hào)：KP172533）。經(jīng)BLAST分析，菌株Z1、菌株Z2的rDNA-ITS序列分別與黃曲霉和米根霉的同源性最高。在同源性最高的序列中各挑選10個(gè)菌株的ITS序列分別與供試菌株構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。如圖3所示，菌株Z1序列與Aspergillusflavus（JF754467.1）的序列親緣關(guān)系最近，且與A.flavus相聚于同一群。如圖4所示，菌株Z2的序列與Rhizopusoryzae（JQ683242.1）的序列親緣關(guān)系最近，且與R.oryzae相聚于同一群。菌株Z1、Z2的ITS序列在NCBI上BLAST結(jié)果與A.flavus和R.oryzae的相似性為分別為99%和99%～100%，進(jìn)而從系統(tǒng)分類學(xué)上進(jìn)一步驗(yàn)證了菌株Z1和菌株Z2；再結(jié)合病原菌的形態(tài)特征，可以確定菌株Z1為黃曲霉（A.flavus），菌株Z2為米根霉（R.oryzae）。

2.3病原菌的生物學(xué)特性

2.3.1培養(yǎng)基種類對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量的影響A.flavus和R.oryzae兩種病原菌在供試的五種培養(yǎng)基上都能生長(zhǎng)，兩種病原菌在百合培養(yǎng)基和百合葡萄糖培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量最大，且在這兩種培養(yǎng)基上的差異不顯著。A.flavus在LA上培養(yǎng)5d后菌落直徑達(dá)19.0mm，R.oryzae在LA上培養(yǎng)2d后，菌落直徑達(dá)40.5mm，7d后產(chǎn)孢量分別為10.35×106個(gè)/ml和8.06×106個(gè)/ml（圖5）。

2.3.2碳源、氮源對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量的影響兩種病原菌對(duì)供試碳源均可利用。A.flavus在葡萄糖為碳源的培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)速度最大，培養(yǎng)5d后菌落直徑達(dá)20.0mm，而在果糖、乳糖和淀粉為碳源的培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)速度次之，且三者間差異不顯著。A.flavus在葡萄糖和果糖為碳源的培養(yǎng)基上產(chǎn)孢量最高，而兩者間差異不顯著；在淀粉為碳源的培養(yǎng)基上產(chǎn)孢量次之，在乳糖為碳源的培養(yǎng)基上產(chǎn)孢量最低（表1）。R.oryzae在葡萄糖和果糖為碳源的培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量最大，且兩者間差異不顯著；在乳糖和淀粉為碳源的培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量次之，且兩者間差異也不顯著（表1）。A.flavus在蛋白胨和硝酸銨為氮源的培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)速度最大，且兩者間差異不顯著，但在蛋白胨為氮源的培養(yǎng)基上產(chǎn)孢量高于硝酸銨為氮源的培養(yǎng)基，在硫酸銨和硝酸鉀為氮源的培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)速度和產(chǎn)孢量都較低（表1）。R.oryzae在蛋白胨為氮源的培養(yǎng)基上，菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量都最大，在硫酸銨和硝酸鉀為氮源的培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)較好，在硝酸銨為氮源的培養(yǎng)基菌絲生長(zhǎng)較差，與無氮培養(yǎng)基差異不顯著，但在硝酸銨為氮源的培養(yǎng)基上產(chǎn)孢量高于硫酸銨和硝酸鉀為氮源的培養(yǎng)基（表1）。

2.3.3培養(yǎng)條件對(duì)對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量的影響由表2可知，兩種病原菌的菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢的最適溫度是25℃。A.flavus和R.oryzae在pH為5-9范圍內(nèi)的PDA培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng)，A.flavus在pH為5、8和9的PDA培養(yǎng)基的菌絲生長(zhǎng)速度均較快，5d后菌落直徑差異不顯著，而在pH為6時(shí)產(chǎn)孢量最大，7d后產(chǎn)孢量為9.85×106個(gè)。R.oryzae在pH為6時(shí)菌絲生長(zhǎng)速度和產(chǎn)孢量最快，2d后菌落直徑達(dá)35.5mm，7d后產(chǎn)孢量為3.75×106個(gè)/ml：光照可促進(jìn)兩種病原菌的菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢，A.flavus在全光照條件下生長(zhǎng)5d后，其菌落直徑達(dá)23.0mm，而R.oryzae在全光照條件下生長(zhǎng)2d后，菌落直徑達(dá)24.0mm，7d后產(chǎn)孢量分別達(dá)13.03×106個(gè)/ml和6.33×106個(gè)/ml。

3討論

本研究通過致病性測(cè)定、形態(tài)學(xué)特性和ITS序列分析，確定引起蘭州百合鱗莖貯藏腐爛病的病原菌是A.flavus和R.oryza，表明此腐爛病害是根霉腐爛病和曲霉腐爛病混合發(fā)生，這兩種腐爛病害在百合鱗莖腐爛的相關(guān)研究中也有報(bào)道，但與本研究中分離到的病原菌不同，其病原菌是A.niger和R.stolonifer。此外，也有較多研究表明圓弧青霉菌、簇狀青霉菌也可導(dǎo)致百合鱗莖腐爛，我們?cè)谔m州百合鱗莖貯藏病害調(diào)查時(shí)也發(fā)現(xiàn)大多腐爛嚴(yán)重的百合鱗莖表面著生有青霉菌菌絲，而且在分離病原菌時(shí)也分離到兩種青霉菌，但致病性測(cè)定表明，這兩種青霉菌均不引起百合腐爛，僅可在刺破表皮的百合鱗莖表面繁殖，表明我們分離到兩種青霉菌僅是腐生菌，而不是病原菌。

生物學(xué)特性研究表明，A.flavus和R.oryzae兩種病原菌的最適生長(zhǎng)條件基本相同，這可能也是兩種菌可以共生而侵染百合導(dǎo)致其發(fā)生腐爛病的原因。此外，這兩種病原菌在LA和LDA培養(yǎng)基上的菌絲生長(zhǎng)速度和產(chǎn)孢量均高于PDA和PSA（在LA和LDA上的菌絲生長(zhǎng)速度和產(chǎn)孢量差異不顯著），表明百合鱗莖本身的營養(yǎng)有利于這兩種菌的繁殖而侵染百合鱗莖導(dǎo)致發(fā)生腐爛病害。目前，國內(nèi)外食用百合的種植面積遠(yuǎn)低于觀賞用百合，因此對(duì)百合鱗莖腐爛病的研究大多關(guān)注觀賞用百合鱗莖種球在生長(zhǎng)發(fā)育過程中的腐爛對(duì)出苗率和花卉品質(zhì)的影響，而尖鐮孢菌是引起觀賞用百合鱗莖種球腐爛的主要病原菌，這與導(dǎo)致蘭州百合鱗莖貯藏期間腐爛的病原菌不同，因此，防治花卉百合種球腐爛病的方法對(duì)食用百合也無借鑒作用。而作為食用的蘭州百合鱗莖在原產(chǎn)地的貯藏方式目前多采用低溫冷庫在零下4℃條件下貯藏，通常不采用其它防腐措施，導(dǎo)致貯藏期間腐爛病的發(fā)生較為嚴(yán)重，本研究通過對(duì)其病原菌的分離和生物學(xué)特性的研究，為下一步開展采用安全的方法消毒百合貯藏冷庫以及預(yù)處理百合鱗莖來防治腐爛病害的發(fā)生奠定了必要的基礎(chǔ)。

4結(jié)論

篇3

1.1莖

雷波野芭蕉的莖分為真莖和假莖兩部分，真莖包括球莖和花序軸。

1.1.1真莖真莖維管束之間的形成層分生的新細(xì)胞通過橫向生長(zhǎng)和縱向生長(zhǎng)，通過均勻增生膨大如球狀，故又稱為“球莖”，根、葉、花及繁殖用的珠芽均由此發(fā)生。真莖大部分位于地表之下，僅有較小部分貼近或稍露出地面，故又被稱為“地下莖”，真莖粗大而又短小，其每年生長(zhǎng)僅為5～10㎝，因此，生長(zhǎng)速度極為緩慢。通過外部形態(tài)特征和內(nèi)部解剖觀察，可以看到真莖通常為球形，有時(shí)橢圓狀球形，球狀橢圓形或卵狀橢圓形，具有明顯的節(jié)，節(jié)間密集，節(jié)上著生有呈螺旋狀排列的葉，葉腐爛后有殘存的葉纖維或葉脫落后留下的葉痕跡。真莖頂端的頂芽發(fā)生于中央圓柱組織，頂芽分生葉和潛伏芽，潛伏芽著生于每片葉的葉鞘的腋部故又叫腋芽，每片葉鞘的腋部都著生有一個(gè)腋芽，腋芽數(shù)量較多，可達(dá)60～120個(gè)，但真正能發(fā)育成珠芽的通常有3～7個(gè)、多時(shí)有8～16個(gè)，珠芽生長(zhǎng)發(fā)育形成新植株，并連同母株共同組成大型的野芭蕉株叢。真莖四周著生肉質(zhì)須根，珠芽分散在肉質(zhì)須根中，其維管束與母株球莖中的維管束相連接和相互貫通。真莖內(nèi)部皮層中具有大量薄壁細(xì)胞，薄壁細(xì)胞中充滿著水分和營養(yǎng)物質(zhì)，因此，真莖在植株開花結(jié)實(shí)后假莖已消耗大量水分和營養(yǎng)物質(zhì)，還可殘留1～2年仍能繼續(xù)分生新幼株。真莖生長(zhǎng)到花芽分化期時(shí)增至最粗，待植株開花、結(jié)果，果實(shí)成熟后才逐漸死亡，真莖體內(nèi)貯藏的水分和養(yǎng)分也轉(zhuǎn)供給珠芽和幼苗生長(zhǎng)，真莖既是根系、葉片、珠芽和花序發(fā)生的地方，同時(shí)又是水分和養(yǎng)分重要的貯藏場(chǎng)所。

1.1.2假莖野芭蕉植株位于地面之上高大，直立、粗壯、挺拔的圓柱狀的“干”，高3.5～7m，直徑30cm～50cm。實(shí)際上，它來源于葉屬于葉的其中一部分，是葉柄基部變扁變薄并向兩側(cè)擴(kuò)展延生而成，這些扁狀葉柄在植物學(xué)上稱為“葉鞘”，葉鞘從粗大短小的真莖長(zhǎng)出，由數(shù)量眾多的葉鞘相互重疊并緊密環(huán)抱形成的“干”，由于它內(nèi)部沒有維管形成層，與木本植物的莖具有顯著區(qū)別，故并非真正的莖，所以被稱為“假莖”。假莖的增粗主要是假莖基部的真莖頂端葉芽分化產(chǎn)生的新葉，在生長(zhǎng)過程中新葉的葉鞘從假莖中央將外側(cè)老的葉鞘向外擠壓，致使葉鞘層數(shù)增多，周徑不斷增大，導(dǎo)致假莖逐漸增粗。假莖中的每一層葉鞘內(nèi)部都由表皮層、厚壁組織、薄壁細(xì)胞、通氣組織、維管束組成。表皮層由厚壁組織與靠近外層的維管束組成，上下表皮層之間有較為發(fā)達(dá)的薄壁組織、通氣組織和分散其中的維管束，薄壁組織和通氣組織形成的眾多間隔空室，維管束有發(fā)達(dá)的韌皮部和數(shù)量較多的導(dǎo)管。葉鞘內(nèi)較多的維管束和大量充滿水分的薄壁細(xì)胞，在纖維強(qiáng)韌拉力和水分膨壓的作用下，使得假莖能挺立地面之上，把葉片舉到高處并平鋪展開捕獲陽光進(jìn)行光合作用。假莖貯藏有大量的水分和豐富的養(yǎng)分，開花結(jié)果后假莖的大部分水分和養(yǎng)分轉(zhuǎn)移到花序和果實(shí)中。因此，假莖既是貯藏水分和養(yǎng)分場(chǎng)所，也是輸送水分和養(yǎng)分的通道，又有支撐和保護(hù)葉片、花序、果序的作用。

1.2葉

雷波野芭蕉葉由葉鞘、葉柄、葉片組成。真莖頂端的葉芽分化形成葉，葉在真莖上螺旋式互生，新葉在假莖中心向上生長(zhǎng)，沿主脈兩側(cè)的左右兩半葉片相互旋轉(zhuǎn)包裹著，當(dāng)整個(gè)葉片全部伸出葉鞘頂端后新葉片開始從上向下逐漸展開。

1.2.1葉鞘葉鞘位于葉柄的下部，是組成假莖的主體。葉鞘外形壓扁、寬大，質(zhì)地為海綿狀肉質(zhì)，具有一定的彈性。葉鞘內(nèi)部結(jié)構(gòu)由表皮層、厚壁組織、薄壁細(xì)胞、通氣組織、維管束組成。葉鞘內(nèi)由薄壁組織和通氣組織形成的眾多間隔空室和維管束組成，維管束分散在葉鞘中部，維管束有發(fā)達(dá)的韌皮部夾帶離生的乳汁導(dǎo)管，多分布于靠近外表皮層處，而外表皮層又由最外層的維管束與厚壁組織組成。葉鞘中的細(xì)胞木質(zhì)化程度較低，組織結(jié)構(gòu)較為疏松，支撐能力和抗風(fēng)能力相對(duì)較弱，加之葉片大型，花序和果穗沉重，如遇大風(fēng)暴雨植株極易折斷或倒伏，所以，野芭蕉多生于山溝兩側(cè)的密林中。

1.2.2葉柄葉柄位于葉鞘和葉片之間，下與葉鞘頂端相連，上與葉片基部相連，肉質(zhì)狀粗壯、厚實(shí)、堅(jiān)韌、挺拔，長(zhǎng)15～45㎝，在假莖上部近直立或斜生，上部開口具深槽，呈深半圓狀強(qiáng)烈內(nèi)彎，下部強(qiáng)烈圓凸，雖然在形態(tài)特征上葉柄與葉鞘具有較大區(qū)別，但二者在內(nèi)部結(jié)構(gòu)則極為相似，都是由表皮層、厚壁組織、薄壁細(xì)胞、通氣組織、維管束組成。外為表皮，表皮內(nèi)具有多層厚壁細(xì)胞與靠近表皮的維管束相間排列，中央由薄壁組織和通氣組織形成的眾多矩形或近四方形蜂窩狀空室，維管束呈45°角分散在薄壁細(xì)胞中；由于主脈內(nèi)部為較為典型的蜂窩狀特殊的結(jié)構(gòu)，因此，具有自重輕，抗彎性強(qiáng)，承載力高等特點(diǎn)，與主脈兩側(cè)葉片中的羽狀平行脈一起組成骨架支撐著大型葉片平展在空間，有利于進(jìn)行光合作用。葉柄兩側(cè)邊緣兩側(cè)逐漸變薄，并向外延伸呈紙質(zhì)或厚紙質(zhì)翅，干后變厚紙質(zhì)或薄革質(zhì)，寬1～2.5㎝，皺縮或平展，并向下與葉鞘邊緣的翅和向上與葉片基部相連成一體。

1.2.3葉脈葉脈為羽狀平行脈，中脈粗大、肥厚、堅(jiān)韌，上部開口呈半圓狀深槽，下部強(qiáng)烈圓凸，從橫切面外層為表皮層，維管束與中部垂直的維管束呈45°角分散排列，薄壁細(xì)胞分布在維管束之間同角度排列，從縱切面來看，主脈內(nèi)的細(xì)胞呈長(zhǎng)方形或正方形空室，為較為典型的蜂窩狀結(jié)構(gòu)，由于主脈內(nèi)部特殊的結(jié)構(gòu)，具有自重輕，抗彎性強(qiáng)，承載力高等特點(diǎn)，與主脈兩側(cè)葉片中的羽狀平行脈一起組成骨架。主脈一是將巨大的葉片舉至高處，支撐葉片使其平展在空間，有利于進(jìn)行光合作用，二是貯藏和輸送水分和養(yǎng)分，三是引導(dǎo)葉片上過多的雨水沿主脈深槽向下流淌，以避免新葉和花序被雨水長(zhǎng)期浸泡，四是承受外界的風(fēng)吹、雨打、雪壓，而不易折斷。野芭蕉能夠在陽光強(qiáng)烈，土壤干旱、貧瘠的生態(tài)環(huán)境中生長(zhǎng)，可能與其發(fā)達(dá)的主脈保證供給水分和營養(yǎng)物質(zhì)以及具有較強(qiáng)的光合作用有密切關(guān)系。

1.2.4葉片葉片寬大，長(zhǎng)橢圓形或長(zhǎng)矩圓形，長(zhǎng)3.2～4.5米，寬0.75～0.89米，先端圓形，稍偏斜，基部漸狹至楔形，并下延與葉柄兩側(cè)的翅相連成一體，葉片兩側(cè)對(duì)稱，邊緣常下垂有利于雨水排除。通過解剖結(jié)構(gòu)可知葉片由上下表皮（表皮細(xì)胞、氣孔器），柵欄組織、海綿組織、葉脈（維管束）組成。葉片上表皮細(xì)胞2～3層，為典型的復(fù)表皮，外壁角質(zhì)層顯著增厚，具有較強(qiáng)的防水、抗旱、抗寒能力和防病蟲害作用，柵欄組織多層排列較為整齊，海綿組織不規(guī)則疏松，葉脈分散在葉肉組織中。氣孔分布在上表皮疏散數(shù)量較少，下表皮緊密數(shù)量較多，沿中脈兩側(cè)的密度較大，數(shù)量較多，向兩側(cè)邊緣其密度逐漸減小，數(shù)量也隨之減少，氣孔密度及數(shù)量還與植株所處生態(tài)環(huán)境和葉片在植株上著生的位置有關(guān)。氣孔既是進(jìn)行光合作用時(shí)氣體進(jìn)出的重要通道，同時(shí)也是病菌入侵的通道。雷波野芭蕉吸芽經(jīng)過生長(zhǎng)發(fā)育形成幼苗，幼苗出土后在生長(zhǎng)初期長(zhǎng)出4～5枚幼葉只有葉鞘沒有葉柄和葉片的，當(dāng)長(zhǎng)到5～8枚幼葉時(shí)不僅具有葉鞘，在葉鞘先端還具有狹窄短小的葉片，8～9片之后的葉不僅有葉鞘還具有明顯的葉柄和葉片。野生芭蕉的葉有兩種類型，一種是沒有葉柄，只有葉鞘或有葉鞘、葉片的葉屬不完全葉，另一種是具有葉鞘、葉柄和葉片的葉屬于完全葉。以后隨著植株的生長(zhǎng)，葉片逐漸增大,直至花芽分化開始，葉片達(dá)到最大為止。野芭蕉葉片面積增大一方面加大了對(duì)光能的捕獲較強(qiáng)，特別是在陽光不足時(shí)有利于更有效地進(jìn)行光合作用，但另一方面葉片面積增大使其蒸騰作用增強(qiáng)，水分也容易過度散失，抗旱能力要求特別高，因此，野芭蕉通常生活在溫暖濕潤的環(huán)境中。此后，隨著葉片逐漸收縮變小，假莖中心部便抽出花序軸，當(dāng)最后在花序軸上長(zhǎng)出狹窄細(xì)短先端鈍的葉片時(shí)，葉的發(fā)生和生長(zhǎng)發(fā)育完全終止，其數(shù)量也不再增加。葉片還具有可以隨不同陽光強(qiáng)度、溫度高低和空氣濕度變化調(diào)節(jié)葉片位置，控制氣孔的開合和蒸騰量。雷波野芭蕉植株的總?cè)~數(shù)及葉片的大小、數(shù)量和壽命與植株、土壤、水分、光照、氣候及生態(tài)環(huán)境的不同等密切相關(guān)，野芭蕉植株從幼苗出土至開花結(jié)果后停止抽葉，一生抽生葉片36～50片，其中劍葉6～18片，小葉9～16片，大葉13～25片，葉的壽命通常為76～298d。葉片是野生芭蕉進(jìn)行光合作用的重要場(chǎng)所，根系將吸收的水分和無機(jī)礦質(zhì)營養(yǎng)通過光合作用，合成有機(jī)養(yǎng)分供植株生長(zhǎng)發(fā)育、開花結(jié)果，因此，葉片的多少和葉面積的大小也是衡量野芭蕉植株生長(zhǎng)發(fā)育的一項(xiàng)重要指標(biāo)。

1.3花序

花序由花序軸、苞片和花組成。雷波野芭蕉真莖頂端中部的生長(zhǎng)點(diǎn)，前期時(shí)僅分化葉芽抽生葉片，植株生長(zhǎng)發(fā)育到一定階段，葉片達(dá)到一定數(shù)量時(shí)，由營養(yǎng)生長(zhǎng)轉(zhuǎn)為生殖生長(zhǎng)，球莖頂端生長(zhǎng)點(diǎn)停止分化為葉芽，不在抽生新的葉片，轉(zhuǎn)而分化形成花芽，花芽生長(zhǎng)分化為花序?；ㄐ蚍只跗诨ㄐ蛟俭w較小，其形態(tài)特征及性別不甚明顯，內(nèi)部的花和果梳用肉眼還難以分辨，進(jìn)入分化中期，花序生長(zhǎng)發(fā)育長(zhǎng)至15～20厘米時(shí)，內(nèi)部花的形態(tài)特征逐漸明顯，通過肉眼就能識(shí)別花的性別和果梳數(shù)量?；ㄑ糠只墒旌笃谠诩偾o內(nèi)部形成花序，花序在假莖內(nèi)部通過花序軸向上延伸，從假莖頂部中心抽出頂生的肉穗狀柔荑花序，穗狀花序上的花由花序基部開始逐漸向頂端開放，且開花時(shí)間較長(zhǎng)，故野芭蕉的花序又屬于無限花序類型。自基部向花序先在基部開兩性花或雌花，然后再向上開雄花，兩性花或雌花逐漸發(fā)育成果實(shí)?；ㄑ糠只侵仓陱臓I養(yǎng)生長(zhǎng)轉(zhuǎn)人生殖生長(zhǎng)時(shí)的內(nèi)在生理變化，花序和花分化開始時(shí)，其植株體內(nèi)的營養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)素類物質(zhì)轉(zhuǎn)化加快，含量顯著升高，通過花芽分化的生理指標(biāo)也可判斷這些物質(zhì)的變化?；ㄑ糠只窃谥檠可L(zhǎng)發(fā)育形成幼苗，幼苗出土后生長(zhǎng)至三年生的植株葉片數(shù)量長(zhǎng)到25～30片，葉展開的面積與接收到的光照時(shí)數(shù)和積溫達(dá)到一定量時(shí)才開始進(jìn)行的，整個(gè)花序和花芽的分化及其形態(tài)特征的變化都在假莖內(nèi)部中央進(jìn)行?；ㄐ蛟诨ㄐ蜉S的作用下從假莖頂端伸出，初時(shí)為橢圓形、卵狀橢圓形，大型，長(zhǎng)18～19.5厘米，直徑12.5～13.5厘米，先端鈍狀圓形或圓形，隨著苞片的開放，花序逐漸變短小為闊卵形。

1.2.1花序軸球莖頂部生長(zhǎng)點(diǎn)初時(shí)僅抽生葉片，但當(dāng)?shù)叵虑o的生長(zhǎng)點(diǎn)伸出地面，生長(zhǎng)點(diǎn)不再分化葉片，轉(zhuǎn)而分化花序軸（莖）及花序，花序軸屬于真莖向上延長(zhǎng)生長(zhǎng)的一部分，花序軸沿假莖中央不斷向上生長(zhǎng)，直至從假莖頂端伸出，將花序伸出假莖頂端外?；ㄐ蜉S厚實(shí)粗壯，圓柱形，深綠色，長(zhǎng)度可達(dá)5～7m，直徑5.5～6.2厘米，被短柔毛，其中大部分被假莖包裹并直立向上延伸，另一部分則伸出假莖外向下彎曲，頂端著生花序，花序在花序軸的作用下與其一起下垂。

1.3.2苞片苞片著生于花序軸上，呈螺旋狀層層重疊緊密排列，將花包裹于內(nèi)側(cè)，海綿狀肉質(zhì)，卵狀橢圓形，長(zhǎng)卵狀橢圓形，長(zhǎng)橢圓形，闊卵形，卵形，長(zhǎng)20～23厘米，寬12～16.3厘米，初時(shí)較長(zhǎng)大，隨著不斷展開逐漸變短小，先端鈍狀圓形或圓形，基部向內(nèi)凹陷呈月牙狀或半圓形，苞片僅在基部最外2～3片為綠色，大型，內(nèi)部沒有花，從基部至頂端外面黃色或淡黃色，內(nèi)面淡黃色，而且每一苞片內(nèi)均著生有花；每苞片內(nèi)花排成二列，有小花（13～）17～24朵。苞片開放順序?yàn)閺纳系较?，從基部至頂端，即先從花序最基部一片開始展開，然后由基部依次向上至頂端逐一展開，展開后的苞片向后反卷，將著生于苞片內(nèi)側(cè)基部的花露出，花隨即開放。苞片通常在展開后反卷，花開2～5天后脫落。

1.3.3花花由花被片、雄蕊和雌蕊組成。花為野芭蕉花序中的雌花、兩性花、中性花的和雄花的統(tǒng)稱。花被花序中的苞片間隔為花序段，而每一段的花分別都著生于苞片內(nèi)，被苞片包裹，只有待苞片展開后才暴露在外開放，所以，花開放的時(shí)間苞片展開先后不同而有所不同?；]有或明顯沒有花梗，直接著生在花軸上，雌花或兩性花較少，位于花序基部的數(shù)輪苞片內(nèi)，其子房生長(zhǎng)發(fā)育后逐漸膨大為果實(shí)；雄花較多，位于花序基部以上至頂端的所有苞片內(nèi)，子房敗育，不能生長(zhǎng)發(fā)育為果實(shí)。

1.3.3.1花被片花被片由合生花被片、離生花被片組成。合生花被片帶形（或條形）或披針狀帶形，長(zhǎng)約5.5厘米，寬1.3～1.5厘米，邊緣薄，半膜質(zhì)，先端具不等大5裂（3+2），裂片卵形、闊卵形、闊三角形，長(zhǎng)2～5毫米，先端鈍形或銳形，兩側(cè)裂片背面先端有或無角刺狀突起；離生花被片長(zhǎng)卵形，長(zhǎng)4.7～5.2厘米，寬1.5～1.9厘米，半膜質(zhì)，先端細(xì)尾尖，基部圓形。

1.3.3.2雄蕊雄蕊由花絲和花藥組成。雄蕊5枚，第6個(gè)雄蕊退化或不存在，花絲絲狀長(zhǎng)1.8～2.5厘米，花藥條形，長(zhǎng)（2.7～）3.4～3.8厘米，2室，藥隔在頂端微突起。

1.3.3.3雌蕊雌蕊由子房、花柱和柱頭組成。子房下位。發(fā)育子房5～7（～9）棱，生長(zhǎng)發(fā)育為果實(shí)，3室，每室具有多數(shù)生于中軸胎座的胚珠，胚珠發(fā)育為種子；敗育子房4～5棱，披針狀柱形，長(zhǎng)2～2.4厘米，直徑0.5～0.6厘米，密被短柔毛，3室，每室具有多數(shù)生于中軸胎座的胚珠，不發(fā)育為種子，花柱扁四棱柱狀，長(zhǎng)4.8～5.4厘米，柱頭膨大，扁形或近頭狀。

1.3.3.4花粉?；ǚ哿４笮?，圓球狀，無萌發(fā)孔，表面光滑至不平、粗糙、皺波狀或?yàn)橐?guī)則的細(xì)顆粒狀突起;花粉粒解剖結(jié)構(gòu)外壁薄,內(nèi)壁厚,內(nèi)壁外層通常為管狀層厚、外方具有明顯的均質(zhì)顆粒層,內(nèi)壁內(nèi)層為均質(zhì)的纖維層。野生芭蕉花期長(zhǎng)，開花時(shí)間可長(zhǎng)達(dá)6～10個(gè)月，花中富含蜜腺，苞片顏色鮮艷，通常可借助蜂類、蠅類、蛾類等昆蟲進(jìn)行傳粉受精。

1.4果穗

果穗由果穗軸和果實(shí)組成。雷波野芭蕉果穗由花序基部10～20片內(nèi)的雌花或兩性花發(fā)育而來。果穗較大，長(zhǎng)27～35㎝，直徑24.5～30㎝，闊橢圓狀，闊橢圓狀球形至近圓球狀，果實(shí)較多，86～143個(gè)，緊密著生。

1.4.1果穗軸果穗軸由花序軸演化而來，粗壯，彎曲，圓柱狀，長(zhǎng)60～85㎝，直徑5.2～7.5㎝，深綠色，被短毛，它既有發(fā)達(dá)的維管束系統(tǒng)，能將位于地表之下真莖中的水分和營養(yǎng)物質(zhì)向上輸送，為花序和果穗的生長(zhǎng)發(fā)育提供所需的水分和營養(yǎng)物質(zhì)，又有發(fā)達(dá)的纖維組織，承重力特強(qiáng)，能承受5～30㎏的重力，將花序和果穗懸垂在3～5m的高空。

1.4.2果實(shí)果實(shí)為漿果肉質(zhì)，通常不開裂，3室。幼時(shí)綠色，密被短柔毛，成熟后深綠色或黑綠色，倒卵狀，長(zhǎng)倒卵狀，闊倒卵狀，倒卵狀橢圓形，長(zhǎng)倒卵狀橢圓形，橢圓狀，長(zhǎng)（6.7～）8.5～11.9㎝，寬5～-7.2㎝，通常具5～7（～9）鈍狀棱角，被疏毛或漸變無毛，先端截平，殘留有干花被片；果柄較長(zhǎng)，長(zhǎng)（0.5～）1～1.5㎝。果皮較厚，外面深綠色，內(nèi)面白色，果肉較少，白色，內(nèi)部充滿較多種子，可能是依靠種子發(fā)育產(chǎn)生的刺激作用而生長(zhǎng)的，每個(gè)果實(shí)中含有種子（12～）24～68（～76）個(gè)。

1.4.3種子種子質(zhì)地硬骨質(zhì)，壓扁或不規(guī)則多棱形，橢圓形，卵性，闊卵形，四方形，近圓形，矩形，長(zhǎng)（1～）1.2～1.4厘米，寬1～1.1厘米，高（0.4～）0.5～0.8（～0.9）厘米，灰黑色，黑色，灰褐色，黑褐色，無光澤，腹面種臍大，圓形，直徑4～6毫米，灰色，背面中部明顯具一小瘤狀突起。種子由種皮、珠孔、合點(diǎn)、胚乳、胚組成。種皮又由外種皮、中種皮、內(nèi)種皮構(gòu)成，外種皮細(xì)胞由柵欄狀排列的厚壁細(xì)胞組成，細(xì)胞壁增厚并木質(zhì)化，中種皮由厚壁細(xì)胞組成，內(nèi)種皮由細(xì)胞壁增厚的石細(xì)胞組成，種子中厚壁細(xì)胞數(shù)量增多，種皮機(jī)械支撐能力和保護(hù)作用增強(qiáng)；胚乳由外胚乳和內(nèi)胚乳組成，外胚乳僅有1層細(xì)胞,分化較弱，內(nèi)胚乳發(fā)達(dá)，占據(jù)了種子較大的體積，為種子后含物的重要貯藏場(chǎng)所，內(nèi)含有豐富的淀粉、蛋白質(zhì)、脂類物質(zhì)等；胚直立、柱狀；珠孔區(qū)由珠孔領(lǐng)和孔蓋組成；合點(diǎn)區(qū)僅具有合點(diǎn)堆，合點(diǎn)區(qū)的內(nèi)種皮連續(xù)。雷波野芭蕉種子的萌發(fā)率較低，約在5%左右，可能與種子的種殼堅(jiān)硬，種皮透水性極差，種子內(nèi)胚得不到充足的水分和營養(yǎng)物質(zhì)有關(guān)，也有可能胚還尚未完全成熟或處于休眠狀態(tài)，因此，導(dǎo)致種子萌發(fā)率的原因很多，既有外部的也有內(nèi)部的以及生理原因。雷波野芭蕉種子即使能夠萌發(fā)，其幼苗長(zhǎng)勢(shì)也非常虛弱，成活率不高，由此可見，野芭蕉在自然狀況下，能進(jìn)行無性繁殖和有性繁殖兩種類型，但在野外自然條件下，吸芽無性繁殖還是野生芭蕉主要繁殖類型。

1.5吸芽

雷波野芭蕉的吸芽由球莖上的葉腋間的腋芽生長(zhǎng)發(fā)育而成，是在假莖基部根際或莖葉腋間自然發(fā)生的極度縮短的球狀短枝。吸芽發(fā)育形成初期基部大上部逐漸變小，形似近圓狀卵形、闊卵狀或長(zhǎng)卵狀，基部白色，上部淡綠白色或淡綠色；夏季陽光強(qiáng)烈，溫度較高，雨水較多濕度較大，水分和營養(yǎng)充足，在這樣的環(huán)境中生長(zhǎng)的球莖較大，形成的吸芽葉鞘較發(fā)達(dá)，節(jié)間距相對(duì)較大，秋末隨著溫度降低而濕度變小，在這樣的環(huán)境中生長(zhǎng)的球莖較小，節(jié)間距相對(duì)較小，根系較多，吸芽上的鱗片狀葉鞘較短小，干枯后常呈褸衣狀。母株死亡后其球莖上發(fā)生的吸芽芽體伸長(zhǎng)生長(zhǎng)形成地下莖，地下莖伸出地面生長(zhǎng)發(fā)育形成幼苗，這些幼苗通?？勺鳛樾轮仓甑挠字辏掠酌缬捎跊]有母株產(chǎn)生的激素和母株葉片遮蔭的影響，容易長(zhǎng)出葉片。吸芽發(fā)生初期不定根沒活動(dòng)不長(zhǎng)根，水分和養(yǎng)分由母株供給，隨著吸芽的生長(zhǎng)發(fā)育芽體不斷增粗伸長(zhǎng)，芽體基部長(zhǎng)出了不定根形成的肉質(zhì)狀須根，即可吸收土壤中的水分和養(yǎng)分供其生長(zhǎng)。吸芽生長(zhǎng)發(fā)育形成的新幼株在沒有與母株分離之前，既可由母株供給其生長(zhǎng)發(fā)育所需的水分和養(yǎng)分，也可通過肉質(zhì)狀須根從土壤中吸收水分和養(yǎng)分供其生長(zhǎng)，直至母株死亡，新幼株經(jīng)生長(zhǎng)、發(fā)育即可自母株分離長(zhǎng)成新植株，新幼株的水分和養(yǎng)分才完全由其球莖產(chǎn)生的肉質(zhì)狀須根獨(dú)立自主吸收。目前所知，在自然狀況下雷波野生芭蕉及整個(gè)芭蕉屬植物中有兩種無性繁殖類型，即吸芽繁殖和肉質(zhì)狀須根繁殖，但以吸芽繁殖為主的無性繁殖是自然繁殖類型中最常見、最普遍的繁殖類型。

2結(jié)論

篇4

首先將ZJ1208野毒株和ZJ1208-ΔWza缺失株分別接種在5mLTSB中，37℃200r/min搖床培養(yǎng)12h，再轉(zhuǎn)接種于30mLTSB中，同法培養(yǎng)11h，測(cè)量菌液OD600，調(diào)整ZJ1208野毒株和ZJ1208-ΔWza缺失株菌液濃度OD600為1，用于攻毒小鼠，并涂板計(jì)數(shù)。將6周齡Balb/c每7只分為一組，共8組。分別將ZJ1208野毒株和ZJ1208-ΔWza缺失株菌液0.3、0.5、1.0和1.5mL／只腹腔接種于各組小鼠。攻毒后每隔2小時(shí)觀察和統(tǒng)計(jì)小鼠發(fā)病和死亡情況。

2結(jié)果與分析

2.1同源重組pUC18-LR-Kan的構(gòu)建

用上下游同源臂引物分別從HPsZJ1208野毒株的基因組DNA中擴(kuò)增得到了Wza基因上游同源臂Wza-UP和下游同源臂Wza-Down(圖3泳道1和3)，上游同源臂5'端和下游同源臂3'端端含有USS識(shí)別序列，用Kan引物從pET-28質(zhì)粒擴(kuò)增得到了Kan基因片段(圖3泳道2)；再將3個(gè)PCR擴(kuò)增片以重疊PCR融合成Wza-UP+Kan+Wza-Down外源打靶片段(圖3泳道4)。將Wza-UP+Kan+Wza-Down片段克隆入pUC-18質(zhì)粒構(gòu)成同源重組質(zhì)粒pUC18-LR-Kan。經(jīng)EcoRⅠ和HindⅢ雙酶切后驗(yàn)證，得到預(yù)期的2684bp同源重組片段和2635bp的線性化質(zhì)粒pUC18(圖4)，外源打靶基因的三個(gè)片段測(cè)序結(jié)果證明沒有發(fā)生堿基突變。

2.2自然轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化

HPs分別用2μg同源重組質(zhì)粒自然轉(zhuǎn)化HPs的5個(gè)不同菌株的感受態(tài)菌，經(jīng)37℃溫箱約36~48h培養(yǎng)，其中5個(gè)菌株中,ZJ1017、ZJ1208、ZJ1404和ZJ1307菌株在30μg/mLKan-TSA平板上長(zhǎng)出菌落(表2)，以組合PCR鑒定(即用Kan引物、Wza引物、同源臂上下游引物Wza-U-F-EcoRⅠ-USS/Wza-D-R-HindⅢ-USS同時(shí)鑒定)結(jié)果只有ZJ1208的菌落有被鑒定為陽性的(表2,圖5A)。將ZJ1208陽性轉(zhuǎn)化子傳至第20代提取基因組DNA，再次進(jìn)行組合PCR驗(yàn)證，結(jié)果依然為陽性(圖5B)，測(cè)序上下游片段和Kan片段正確，以上驗(yàn)證結(jié)果表明獲得了Wza缺失株，命名為ZJ1208-ΔWza株。

2.3ZJ1208-ΔWza株與野毒株的生物學(xué)特性比較

2.3.1菌落形態(tài)的比較

將-70℃凍存的ZJ1208-ΔWza缺失株株和ZJ1208野毒株分別涂布在TSA平板上，37℃溫箱培養(yǎng)24h后，可見二者均長(zhǎng)出半透明，圓潤的小菌落(直徑約0.5~2mm)；此結(jié)果表明與野毒株相比,ZJ1208-ΔWza缺失株的菌落形態(tài)并沒有發(fā)生明顯變化(圖6)。

2.3.2生長(zhǎng)速率的比較

結(jié)果如圖7所示，在整個(gè)生長(zhǎng)過程中，ZJ1208野毒株生長(zhǎng)速率要快于ZJ1208-ΔWza缺失株，二者都在12h時(shí)OD600值達(dá)到最大，分別為2.196和1.246；但其差值達(dá)到了0.95；ZJ1208野毒株的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期在約10h時(shí)結(jié)束，而缺失株ZJ1208-ΔWza在培養(yǎng)8h，即提前2個(gè)小時(shí)結(jié)束。二者的活菌數(shù)基本都在8~10h間達(dá)到最大，但二者每毫升活菌數(shù)對(duì)數(shù)值的差值也在0.4~0.5個(gè)數(shù)量級(jí)之間。在其繼續(xù)培養(yǎng)之后，二者活菌數(shù)均逐漸減少。

2.3.3莢膜染色和形態(tài)結(jié)構(gòu)的比較

取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)中前期的突變株ZJ1208-ΔWza缺失株株和ZJ1208野毒株進(jìn)行莢膜染色，顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，突變株ZJ1208-ΔWza缺失株中存在比例較多的長(zhǎng)鏈狀菌體和長(zhǎng)桿狀菌體，約占總菌數(shù)的30%~40%，而ZJ1208野毒株菌體大部分則較短小，松散，單個(gè)菌體居多。在莢膜表達(dá)量初步比較中發(fā)現(xiàn)，ZJ1208-ΔWza缺失株和野毒株菌體周圍都可見被染成綠色的莢膜成分存在(圖8)。

2.3.4菌體沉降速率比較

將ZJ1208-ΔWza缺失株和ZJ1208野毒株過夜培養(yǎng)的菌液室溫靜置5h，每隔1h進(jìn)行觀察，2小時(shí)后ZJ1208-ΔWza缺失株菌體即可出現(xiàn)肉眼可辨的菌體沉淀，并且隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，沉淀越明顯；而ZJ1208野毒株菌體在5h未發(fā)生沉淀，菌液依然渾濁；此現(xiàn)象與2者OD600變化相符合(圖9)。

2.3.5細(xì)胞吞噬實(shí)驗(yàn)

細(xì)菌計(jì)數(shù)結(jié)果表明，1個(gè)MOI感染時(shí)，ZJ1208野毒株被吞噬的細(xì)菌數(shù)量為9.25×103，而ZJ1208-ΔWza缺失株為6.95×105，吞噬率分別為0.064%和3.8%；10個(gè)MOI感染時(shí)，ZJ1208野毒株被吞噬的數(shù)量為1.23×105，而ZJ1208-ΔWza缺失株為0.88×106，吞噬率分別為0.085%和0.48%(圖10)。說明ZJ1208-ΔWza缺失株比ZJ1208野毒株更容易被PAM所吞噬。

2.3.6小鼠攻毒實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，ZJ1208野毒株接種的四個(gè)組別小鼠都全部死亡，并且隨著攻毒劑量的增加，小鼠起始死亡時(shí)間隨之提前。而ZJ1208-ΔWza缺失株0.3mL接種組未有小鼠死亡，0.5mL組只有一只小鼠死亡，并且死亡時(shí)間比同劑量ZJ1208野毒株組的小鼠死亡時(shí)間滯后10個(gè)小時(shí)。ZJ1208-ΔWza缺失株1mL和1.5mL接種組雖然小鼠也全部死亡，但是死亡時(shí)間比相同劑量的野毒株ZJ1208組的滯后(表3)。說明將Wza基因缺失后，ZJ1208-ΔWza缺失株對(duì)小鼠的毒力相比野毒株ZJ1208有明顯下降。

3討論

構(gòu)建缺失株在研究微生物生物學(xué)特性方面起著舉足輕重的作用，但是其轉(zhuǎn)化技術(shù)到目前為止還依然不是很成熟;包括多數(shù)細(xì)菌和真菌在內(nèi)，其轉(zhuǎn)化方法都具有菌株特異性或其方法本身的不成熟(Juetal.,2012；孫磊等,2005;Xueetal.,1999)；然而HPs更是如此，這也是針對(duì)HPs研究中，國內(nèi)外目前都在努力克服的一個(gè)關(guān)鍵性技術(shù)難點(diǎn)。Anna(2005)通過自然轉(zhuǎn)化法構(gòu)建HPs缺失株；Chen(2012)通過構(gòu)建大腸桿菌-副豬穿梭質(zhì)粒在電轉(zhuǎn)化副豬嗜血桿菌方面也進(jìn)行了初步嘗試；Zhang等(2012)利用篩選出的天然感受態(tài)副豬嗜血桿菌通過自然轉(zhuǎn)化成功獲得ompP2缺失株；申果(2013)也通過自然轉(zhuǎn)化成功構(gòu)建了cdt基因缺失突等。在本實(shí)驗(yàn)構(gòu)建HPsWza基因缺失株的實(shí)驗(yàn)過程中，針對(duì)篩選的5個(gè)HPs菌株，除了對(duì)自然轉(zhuǎn)化方法的嘗試和優(yōu)化外，本實(shí)驗(yàn)室前后亦對(duì)電轉(zhuǎn)化方法進(jìn)行了摸索和嘗試，但最終未能夠用電轉(zhuǎn)化方法獲得陽性缺失株；采用自然轉(zhuǎn)化法也是僅僅成功構(gòu)建了ZJ1208HPs菌株，其他4個(gè)菌株中3個(gè)雖在Kan抗性平板可以長(zhǎng)出菌落，但都沒能獲得陽性缺失株，以上也印證了HPs轉(zhuǎn)化方法的不成熟和HPs菌株缺失株難以被構(gòu)建的現(xiàn)象。目前推測(cè)限制修飾系統(tǒng)可能是副豬嗜血桿菌轉(zhuǎn)化效率低下的一個(gè)關(guān)鍵因素。限制修飾系統(tǒng)最初在大腸桿菌中被發(fā)現(xiàn)，其分為4種類型(Robertsetal.,2009)，每種類型由一種限制性內(nèi)切酶和對(duì)應(yīng)的一種甲基化酶組成；不同的菌屬或菌株可能又會(huì)存在酶結(jié)構(gòu)上的差異性(Tombetal.,1997)。幾乎90%的細(xì)菌包含限制修飾系統(tǒng)，而且43%的細(xì)菌存在以上4種或更多的限制修飾系統(tǒng)(Robertsetal.,2004)；。Ando等(2000)從分子機(jī)制水平驗(yàn)證了幽門螺桿菌的限制修飾系統(tǒng)對(duì)質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化和重組起著阻礙的作用。因此，在前期電轉(zhuǎn)方法的嘗試中，根據(jù)Donahue等(2000)的方法，本實(shí)驗(yàn)室亦嘗試?yán)脽o細(xì)胞抽提物(cellfreeextracts,CFEs)先預(yù)處理質(zhì)粒，然后再轉(zhuǎn)化副豬，但并沒有取得成功。并且質(zhì)粒在被CFEs處理回收后，有大量質(zhì)粒被降解，條件的優(yōu)化并不能抑制質(zhì)粒的降解；另外，人們也通過預(yù)先確定受體菌中的限制修飾系統(tǒng)所包含的甲基化酶的種類，從而用商品化相應(yīng)的甲基化酶在試管中預(yù)先處理，再轉(zhuǎn)化受體菌，從而證明也可以提高外來質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化效率(Kimetal.,2010)。基于以上經(jīng)驗(yàn)，筆者認(rèn)為應(yīng)該先從基因水平上確定副豬嗜血桿菌的限制修飾系統(tǒng)的種類，然后有針對(duì)性的利用甲基化酶來修飾重組質(zhì)粒，無論是針對(duì)自殺質(zhì)粒或是穿梭質(zhì)粒，或許此方式可提高自然轉(zhuǎn)化和電轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)化效率。莢膜合成基因在大腸桿菌和其他菌屬已被鑒定出，由于其外膜合成基因和蛋白空間構(gòu)象具有保守性，華中農(nóng)業(yè)大學(xué)通過對(duì)HPs基因進(jìn)行測(cè)序，并將其與其他菌科的相關(guān)基因和蛋白進(jìn)行序列和空間構(gòu)象對(duì)比，獲得了HPs相關(guān)的基因序列功能，同時(shí)莢膜合成相關(guān)基因亦被鑒定出來，其中在HPs中被鑒定出的Wza基因被推測(cè)具有莢膜多糖運(yùn)輸功能(Xuetal.,2011)。因此，本實(shí)驗(yàn)通過構(gòu)建HPs的Wza基因缺失株，一方面來研究證實(shí)Wza在HPs中的功能，另一方面來研究莢膜在HPs毒力和致病性中的作用。從本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果來看，ZJ1208菌株至少在體外培養(yǎng)時(shí)，野毒株和Wza缺失株都可形成較薄的莢膜，并不能在光學(xué)顯微鏡下看到明顯差異；或許其原因可能存在除Wza基因外其他有關(guān)莢膜合成的代償代謝途徑，另外ZJ1208-ΔWza缺失株在室溫靜置可形成菌體沉淀，而ZJ1208野毒株不能，并且在靜止時(shí)其OD600在1~2h稍有增長(zhǎng)，隨后平穩(wěn)，說明ZJ1208野毒株在短時(shí)間靜置時(shí)有菌體進(jìn)行了分裂繁殖，且不形成沉淀。Cheng等(2010)對(duì)肺炎桿菌的一種粘液蛋白合成基因rmpA缺失后，菌體K2莢膜合成減少，從而導(dǎo)致菌體粘度降低，低速離心時(shí)，rmpA缺失株可以在試管形成沉淀而野毒株不形成沉淀，并且缺失株對(duì)小鼠的毒力亦降低；因此作者推測(cè)，ZJ1208的Wza基因亦只對(duì)HPs莢膜合成中的一種或幾種粘性多糖的運(yùn)輸或合成起著關(guān)鍵性作用，但并不在菌體莢膜的所有多糖的運(yùn)輸或合成中起著關(guān)鍵性作用。另一方面，通過對(duì)ZJ1208-ΔWza缺失株株和ZJ1208野毒株的菌落形態(tài)，莢膜染色菌體形態(tài),生長(zhǎng)速率以及抗PAM吞噬能力大小和對(duì)小鼠毒力等生物學(xué)特性的初步比較和分析后，發(fā)現(xiàn)其二者的菌落形態(tài)并沒有明顯的差異，ZJ1208-ΔWza株生長(zhǎng)速率相比起ZJ1208野生株表現(xiàn)的明顯較慢，作者認(rèn)為可能是缺失株在菌體莢膜形成過程中的異常從而使其對(duì)培養(yǎng)環(huán)境相較于野毒株表現(xiàn)的更敏感和脆弱，使其活菌死亡或是裂解的快，亦或是缺失株本身在生物代謝上的異常從而造成了其生長(zhǎng)的緩慢；另外，在8-~10h間，活菌數(shù)達(dá)到最大，這與OD600變化并不一致，原因可能是菌體死亡速率與二分裂的速率基本持平，但ZJ1208-ΔWza株菌體比起ZJ1208野生株菌體裂解的更快，因此可以看到對(duì)數(shù)生長(zhǎng)曲線中ZJ1208野生株在8~10h后仍然在攀升,而ZJ1208-ΔWza株已基本保持平行狀態(tài)，，這從另一方面也驗(yàn)證了作者對(duì)缺失株對(duì)培養(yǎng)環(huán)境相較于野毒株表現(xiàn)的更敏感和脆弱這一推測(cè)；同時(shí)，缺失株中較長(zhǎng)的菌體比例明顯增加，可能原因是其生長(zhǎng)緩慢，造成了菌體二分裂的周期延長(zhǎng)和緩慢，從而使菌體與菌體之間連接在一起，最終形成了看似較長(zhǎng)的菌體；在抗PAM吞噬實(shí)驗(yàn)中，相同MOI情況下，PAM對(duì)ZJ1208-ΔWza的吞噬能力顯著高于ZJ1208野生株，尤其在MOI為1并作用1h的情況下，二者的差異尤為顯著；另外，在MOI增加時(shí)，野生株ZJ1208被PAM吞噬的數(shù)量亦成明顯增長(zhǎng)，但ZJ1208-ΔWza株被吞噬的數(shù)量卻增加的幅度較小，甚至不明顯；其可能原因是在MOI為1，菌體與PAM相互作用1h的情況下，PAM對(duì)ZJ1208-ΔWza菌體的吞噬幾乎到達(dá)飽和狀態(tài)，因此在增加菌體數(shù)量時(shí)，一定數(shù)量的PAM亦不能更高效地對(duì)其進(jìn)行吞噬，而野生株ZJ1208菌體相比較ZJ1208-ΔWza，其對(duì)PAM不敏感，PAM對(duì)野生株ZJ1208吞噬的效率并不高，此時(shí)增加菌體數(shù)量時(shí)，可以較線性的增加PAM對(duì)ZJ1208的吞噬數(shù)量。小鼠的毒力實(shí)驗(yàn)亦表明了ZJ1208-ΔWza和野生株ZJ1208的毒力存在明顯的差異，其在0.3和0.5mL組表現(xiàn)得尤為明顯。

4結(jié)論

篇5

1．學(xué)校、老師對(duì)實(shí)驗(yàn)課的重視度不高

大多數(shù)生物教師在傳統(tǒng)教學(xué)理念的影響下，認(rèn)為生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)只是生物教學(xué)的一種輔助工具而存在，沒有理論課來的重要．這就導(dǎo)致許多學(xué)校的實(shí)驗(yàn)課基本上是講解、背誦實(shí)驗(yàn)?zāi)康模瑢?shí)驗(yàn)原理，實(shí)驗(yàn)器材，實(shí)驗(yàn)步驟，實(shí)驗(yàn)結(jié)果，考試時(shí)也僅僅是粗略地考查實(shí)驗(yàn)，片面強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)操作的熟練化，注重實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，輕視在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)問題，分析看到的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象，實(shí)驗(yàn)課淪為一種簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)技能訓(xùn)練，而研究方法的探尋不被重視，它的重要科學(xué)價(jià)值被抹殺．常此以往學(xué)生不僅失去了獨(dú)立思考的機(jī)會(huì)，更會(huì)變成只會(huì)機(jī)械背誦，應(yīng)付考試的機(jī)器，創(chuàng)新精神的缺失將更加嚴(yán)重．生物學(xué)的教學(xué)形式迫切需要變革，生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)急需改進(jìn)，一定要將生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)落到實(shí)處才能培養(yǎng)出具有創(chuàng)新精神的新時(shí)代學(xué)生．另一方面，實(shí)驗(yàn)室利用率很低，大都閑置著．大部分學(xué)校都有單獨(dú)的生物實(shí)驗(yàn)室，但平均利用率很低．學(xué)校在進(jìn)行課程安排時(shí)將大部分的時(shí)間安排在理論課教學(xué)上，學(xué)生的實(shí)驗(yàn)課時(shí)間被大大壓縮，理論與實(shí)踐存在脫節(jié)的現(xiàn)象．

2．學(xué)校的硬件設(shè)施沒有跟上

學(xué)校硬件設(shè)施的配備與學(xué)校對(duì)生物實(shí)驗(yàn)的重視程度，學(xué)校所在地的經(jīng)濟(jì)文化的發(fā)展程度有著極其密切的關(guān)聯(lián)．總體而言，當(dāng)前大多數(shù)地區(qū)的經(jīng)濟(jì)發(fā)展程度都可以滿足基本的硬件設(shè)施配備需要，只要學(xué)校更加重視這方面的教育，加大一定的投入，基本的實(shí)驗(yàn)器材還是可以滿足的．但生物學(xué)實(shí)驗(yàn)受外界客觀因素的影響較大．客觀條件的限制是實(shí)驗(yàn)課開設(shè)度不高的重要影響因素．有一些生物學(xué)實(shí)驗(yàn)需要用到較為先進(jìn)的觀察儀器，但這些儀器的價(jià)格高昂，大多數(shù)學(xué)校很難拿出足夠的經(jīng)費(fèi)引進(jìn)．另一些實(shí)驗(yàn)需要用到活體，像家兔，小白鼠，蟾蜍等，這些實(shí)驗(yàn)材料的儲(chǔ)存需要找專人看管，投入的人力物力較大．其次，在一些偏遠(yuǎn)地區(qū)或者比較偏遠(yuǎn)的農(nóng)村，想達(dá)到和大城市學(xué)校一樣的實(shí)驗(yàn)配備在現(xiàn)有的經(jīng)濟(jì)條件下是不允許的，許多農(nóng)村中學(xué)缺乏實(shí)驗(yàn)課程必備實(shí)驗(yàn)器材，開設(shè)實(shí)驗(yàn)課困難重重．

3．缺乏實(shí)驗(yàn)研究意識(shí)

當(dāng)前學(xué)校開設(shè)的一些生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，僅僅是從書本中選取一些操作相對(duì)簡(jiǎn)便，耗費(fèi)的人力物力相對(duì)較少，沒有危險(xiǎn)性的最基本的實(shí)驗(yàn)，這已經(jīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足新課程的需要．理想與現(xiàn)實(shí)總是存在一定的差距，當(dāng)前的生物學(xué)教學(xué)中存在一些薄弱環(huán)節(jié)需要加強(qiáng)．

二、提高高中生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)水平的舉措

1．增強(qiáng)學(xué)校和老師對(duì)于高中生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)的重視

生物教師和學(xué)生都應(yīng)當(dāng)充分地認(rèn)識(shí)到，上實(shí)驗(yàn)課不是一種上課的新形式，重要的是通過實(shí)驗(yàn)?zāi)苁箤W(xué)生更愿意動(dòng)手操作、與他人展開合作和積極探索科學(xué)．在實(shí)驗(yàn)過程中，學(xué)生為著相同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪M(jìn)行相互分工合作，在合作中認(rèn)識(shí)到人與人之間合作的重要性;親身參與實(shí)驗(yàn)的每一個(gè)步驟，學(xué)生實(shí)事求是的科學(xué)態(tài)度得到培養(yǎng);實(shí)驗(yàn)的失敗與成功存在很大的不確定性，失敗的痛苦，成功的喜悅教會(huì)學(xué)生要有一個(gè)健康良好的心理素質(zhì)，不畏失敗，堅(jiān)持不懈，克服艱難、勇于探索，積極進(jìn)取．這些實(shí)驗(yàn)可以教給學(xué)生知識(shí)的同時(shí)，助力學(xué)生的健康成長(zhǎng)．學(xué)校和老師要從根本上真正認(rèn)識(shí)到實(shí)驗(yàn)課的重要性，協(xié)調(diào)好實(shí)驗(yàn)課與理論課的比重，培養(yǎng)學(xué)生學(xué)習(xí)生物的興趣，引導(dǎo)學(xué)生參與到生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)中來．

2．完善學(xué)校的實(shí)驗(yàn)設(shè)備

高中生物對(duì)于學(xué)生來說也是比較重要的一門高中學(xué)科，在理科高考中占據(jù)一定的地位．生物課的教學(xué)成果差的話，將影響學(xué)生的整個(gè)高中生活．高中生物的很多知識(shí)都需要一些實(shí)驗(yàn)來證明，例如細(xì)胞分裂等實(shí)驗(yàn)．這些實(shí)驗(yàn)如果不能讓學(xué)生實(shí)地得去操作，那么對(duì)于學(xué)生來說，并不能深入地理解這些實(shí)驗(yàn)所講述的原理．所以學(xué)校引進(jìn)優(yōu)良的生物實(shí)驗(yàn)設(shè)備是十分必要的，學(xué)?？梢韵蛘暾?qǐng)一定款項(xiàng)來重新完善實(shí)驗(yàn)室設(shè)備或者向社會(huì)的慈善的人士求助，幫助學(xué)校修葺生物實(shí)驗(yàn)室，讓學(xué)生能夠在設(shè)備完善的實(shí)驗(yàn)室里學(xué)習(xí)，提升學(xué)生的生物成績(jī)，讓學(xué)生在實(shí)驗(yàn)過程中愛上這個(gè)這門學(xué)科．

3．提升學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)研究的重視

生物學(xué)的發(fā)展需要進(jìn)行大量的實(shí)驗(yàn)，僅僅依靠機(jī)械背誦是不能牢固掌握生物學(xué)知識(shí)的內(nèi)核的，在課堂教學(xué)中，學(xué)生只有主動(dòng)參與課堂教學(xué)，逐步對(duì)生物學(xué)科產(chǎn)生一定的學(xué)習(xí)興趣，才能提高課堂學(xué)習(xí)的效率，使學(xué)生獲得更多的知識(shí)．實(shí)驗(yàn)是人類認(rèn)識(shí)和研究生物科學(xué)的一種直觀的重要的手段，也是老師進(jìn)行生物學(xué)教學(xué)的一種重要手段．教師指導(dǎo)學(xué)生利用一定的材料，藥品，儀器設(shè)備，按照指定的內(nèi)容去進(jìn)行一系列生物實(shí)踐活動(dòng)是實(shí)驗(yàn)課的主要形式．通過生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，學(xué)生獲得一些對(duì)生物界的感性認(rèn)識(shí)，學(xué)生學(xué)習(xí)生物的基本技能得到鍛煉．由認(rèn)識(shí)，分析，掌握，到綜合運(yùn)用生物學(xué)知識(shí)的能力增強(qiáng)．學(xué)生學(xué)習(xí)生物學(xué)的興趣被生動(dòng)有趣的生物學(xué)實(shí)驗(yàn)大大激發(fā)，實(shí)驗(yàn)可以培養(yǎng)學(xué)生秉持一種實(shí)事求是的科學(xué)態(tài)度．綜上所述可見，要完成高中生物學(xué)的教學(xué)任務(wù)必須提高實(shí)驗(yàn)課的質(zhì)量，要提高整個(gè)學(xué)科的綜合成績(jī)，也必須重視實(shí)驗(yàn)課．對(duì)此，提出以下舉措:學(xué)校要從長(zhǎng)遠(yuǎn)出發(fā)，積極開展一些生物實(shí)驗(yàn)型研究性學(xué)習(xí)，生物界繽紛多彩的，可以拿來進(jìn)行研究的課題也層出不窮．引進(jìn)一些具有較強(qiáng)帶領(lǐng)學(xué)生進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究的骨干教師，帶領(lǐng)學(xué)生進(jìn)行科學(xué)研究，

三、對(duì)高中生物的實(shí)驗(yàn)教學(xué)的展望

篇6

1通過“饑餓教學(xué)”提高教學(xué)難度

“饑餓教學(xué)”的知識(shí)應(yīng)有一定的難度，學(xué)生必須付出一定的努力才能完成，否則不能激起學(xué)生的求知欲。例如，在學(xué)完“伴性遺傳”后，出示例題(2010年江蘇省高考題第29題)，鼓勵(lì)有興趣的學(xué)生課后完成:遺傳工作者在進(jìn)行遺傳病調(diào)查時(shí)發(fā)現(xiàn)了一個(gè)甲、乙兩種單基因遺傳病的家系，系譜如圖所示，請(qǐng)回答:(所有概率用分?jǐn)?shù)表示)(1)甲病的遺傳方式是。(2)乙病的遺傳方式不可能是。(3)如果II4、II6不攜帶致病基因，按照甲、乙兩種遺傳病最可能的遺傳方式，請(qǐng)計(jì)算:①雙胞胎(IV1與IV2)同時(shí)患有甲種遺傳病的概率是。

②雙胞胎中男孩(IV1)同時(shí)患有甲、乙兩種遺傳病的概率是。女孩(IV2)同時(shí)患有甲、乙兩種遺傳病的慨率是。此題完全沒有超出教材知識(shí)范圍，掌握了課堂所學(xué)解遺傳概率問題的方法，完全能夠做出來;此題為高考題，且具有一定的難度，對(duì)學(xué)生來說是一個(gè)挑戰(zhàn)，能引起學(xué)生征服此題的“饑餓”，學(xué)生都想通過做出此題來證明自己的解題水平;此題具有相當(dāng)?shù)木C合性，將各種遺傳概率問題集中到一起，能起到很好的訓(xùn)練作用。

2通過“饑餓教學(xué)”提高學(xué)生的靈活性

篇7

【關(guān)鍵詞】醫(yī)學(xué)微生物學(xué)；直觀教學(xué)；教學(xué)研究

直觀教學(xué)是從具體形象入手，通過直觀的感知刺激不斷強(qiáng)化，使學(xué)生從視覺、聽覺、觸覺等多角度感知表象，開發(fā)學(xué)生形象思維能力，強(qiáng)化學(xué)生記憶認(rèn)知效果［1］。筆者在醫(yī)學(xué)微生物學(xué)教學(xué)中采用直觀教學(xué)法，討論如下。

1實(shí)物直觀

1.1標(biāo)本觀察提供實(shí)物讓學(xué)生去感知，在此基礎(chǔ)上，再輔助以相應(yīng)講解、強(qiáng)化，可以使學(xué)生牢固掌握微生物的生物學(xué)形狀，達(dá)到過目難忘，這種效果是單純抽象語言敘述所無法達(dá)到的。

1.2實(shí)驗(yàn)示教醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)復(fù)雜，標(biāo)本具有一定的致病性，且要求嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，是實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)的難點(diǎn)。到位的實(shí)驗(yàn)示教可以保證良好的實(shí)驗(yàn)效果，培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶W(xué)習(xí)態(tài)度，一絲不茍的工作作風(fēng)，對(duì)學(xué)生今后從事臨床研究極為重要。

1.3訪問調(diào)查醫(yī)學(xué)微生物學(xué)涉及面廣，涵蓋性強(qiáng)，與醫(yī)學(xué)免疫學(xué)、內(nèi)科學(xué)、實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)等多學(xué)科相聯(lián)系，因此，在條件允許的情況下帶領(lǐng)學(xué)生到醫(yī)院訪問實(shí)際病例，觀察臨床表現(xiàn)，以了解微生物的致病性。

實(shí)物直觀優(yōu)點(diǎn)在于學(xué)生直接接觸物體，所獲感性材料真實(shí)具體，有利于準(zhǔn)確理解知識(shí)，在此過程中，學(xué)生易產(chǎn)生學(xué)習(xí)興趣，提高學(xué)習(xí)積極性。但實(shí)物直觀的缺點(diǎn)是易受客觀條件限制，需用模像直觀加以彌補(bǔ)。

2模像直觀

2.1圖片觀察提供實(shí)物照片或簡(jiǎn)化了的示意圖，通過掛圖、投影方式展示出來，滿足學(xué)生的感官認(rèn)識(shí)需要。

2.2繪圖教學(xué)人的感知規(guī)律其中包含活動(dòng)律，即在固定不便的背景上活動(dòng)的物體容易被感知，因此教師在教學(xué)中畫圖優(yōu)先于掛圖。

2.3動(dòng)畫展示課程中許多知識(shí)點(diǎn)研究微生物動(dòng)態(tài)活動(dòng)規(guī)律，如病毒的復(fù)制周期，衣原體感染細(xì)胞的過程，噬菌體的生活周期等，將這些書本上單純語言敘述的枯燥過程制成模擬動(dòng)畫呈現(xiàn)出來，具體而直觀，有利于調(diào)動(dòng)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣。

2.4電子課件應(yīng)用計(jì)算機(jī)技術(shù)，教師根據(jù)課程需要制作個(gè)性化的電子課件進(jìn)行微生物教學(xué)也是十分必要的。電子課件可以整合書籍、圖片、動(dòng)畫、聲音等直觀素材［2］，是最有效的模像直觀手段。

3言語直觀

3.1口訣式微生物學(xué)中零散的知識(shí)點(diǎn)很多，很難記憶，將這些知識(shí)點(diǎn)綜合起來，編成通俗易懂而又朗朗上口的口訣，則方便記憶。如描述破傷風(fēng)芽胞梭菌生物學(xué)性狀有這樣的口訣：細(xì)長(zhǎng)桿菌周鞭毛，幼齡運(yùn)動(dòng)很活躍，革蘭陽性鼓棰樣，端立芽胞要記牢。學(xué)生根據(jù)口訣，扎實(shí)記憶知識(shí)點(diǎn)，避免了造成相關(guān)特征的含糊和混淆。

3.2類比式為了使學(xué)生深刻理解典型知識(shí)點(diǎn)，類比方式在微生物教學(xué)中使用較為普遍。如介紹結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)特性，將其擬人化總結(jié)為3個(gè)字：饞(專性需氧，營養(yǎng)要求極高，pH6.5-6.8)、懶(生長(zhǎng)速度極慢，18-24h繁殖一代，2-4w見菌落)、賴(菌落極粗糙，聚集生長(zhǎng)，呈菜花狀)。肺結(jié)核典型臨床表現(xiàn)3個(gè)字：熱(發(fā)熱)、汗(盜汗)、美(面部潮紅)。類比法化難為易，變抽象為具體，引起學(xué)生興趣，加深學(xué)生對(duì)知識(shí)的理解。

3.3情境式這種方法是啟發(fā)式教學(xué)的一部分，設(shè)立問題情境，組織學(xué)生討論，使學(xué)生開動(dòng)腦筋，運(yùn)用課程相關(guān)知識(shí)解決問題，設(shè)立具體情境，啟發(fā)學(xué)生發(fā)散式思維，知識(shí)在頭腦中有意識(shí)地整合與重組，鍛煉了學(xué)生分析問題解決問題的能力。言語直觀的優(yōu)點(diǎn)是不受時(shí)空條件限制，使用范圍廣，但言語直觀往往不如實(shí)物直觀和模像直觀鮮明、具體、完整和穩(wěn)定。

【參考文獻(xiàn)】

篇8

一年一代,成蟲壽命約一年。于每年四月,越冬成蟲開始活動(dòng),覓食及交尾產(chǎn)卵,卵經(jīng)歷共三齡幼蟲和蛹的階段羽化成成蟲,六月至七月性成熟。據(jù)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)觀察,成蟲在光線之下,如有遮蔽物即全部躲于遮蔽物下方;若無遮蔽物,會(huì)在塑料缸內(nèi)同一個(gè)角落聚集成堆,到了夜晚則分頭覓食(圖1)。野外炮步甲經(jīng)常棲息于在肥力較好,有機(jī)質(zhì)含量多,濕度較大的田塊的土壤和田埂縫隙中,河流岸邊等,沒有固定的巢穴,有時(shí)也在其他昆蟲(如螻蛄或蚯蚓)造成的洞穴中或天然裂縫中,在10-20厘米的表土層中容易找到。實(shí)驗(yàn)室觀察可見在無天然洞穴時(shí),成蟲會(huì)自主挖洞,以第一對(duì)步足和上顎掘土,因沒有專門的挖掘結(jié)構(gòu),其挖洞速度稍慢,一周左右可挖出剛好伸入頭部大小的洞穴,一個(gè)月以上基本可以見到能容納整只炮步甲的洞穴。成蟲食性很廣,不僅取食其他昆蟲,而且會(huì)食用饅頭水果等。在可以選擇時(shí),會(huì)優(yōu)先食用其它成蟲尸體,如干黃粉蟲和活黃粉蟲,炮步甲會(huì)首先取食干燥的黃粉蟲。在食物充足時(shí)沒有見到取食活體昆蟲的現(xiàn)象。當(dāng)搶食同一只黃粉蟲時(shí),兩只炮步甲會(huì)向?qū)Ψ絿娚?除搶食外,它們并不互相攻擊同類,但若有自然死亡的炮步甲,剩余活體便會(huì)取食死亡個(gè)體的內(nèi)臟,剩下頭胸部及腹部的外殼。

2防御行為關(guān)于防御行為作了如下幾個(gè)方面的調(diào)查:

2.1.瞄準(zhǔn)取0.3x0.3mm大小的雙面膠,一面粘于蟲體背部正中一面固定在鐵絲上(雙面膠的黏力需要強(qiáng))用以固定蟲體,再使用鑷子加以刺激(此操作需在屋內(nèi)只有單一光源時(shí)可拍攝照片捕捉到噴射軌跡):1.刺激腿,炮步甲能夠通過靈活的腹部末端進(jìn)行瞄準(zhǔn),當(dāng)刺激其足時(shí),它可以準(zhǔn)確噴射到被刺激的部位。噴射來自前腿方向的刺激,需要腹部末端有較大的扭轉(zhuǎn)角度,來自后腿方向的,需要較小的扭轉(zhuǎn)角度。2.刺激后背,刺激后背時(shí),炮步甲不能像刺激腿那樣精確的定位,它的腹部末端向上彎曲到最大角度所噴出的液體,基本與身體平行,無論刺激頭部、前胸、背板還是鞘翅,它都以同一向上彎曲到最大的角度噴射,但橫向角度還是有區(qū)別的,如刺激鞘翅左邊緣即噴射偏向左邊,刺激鞘翅右邊緣即結(jié)果相反。3.跟蹤瞄準(zhǔn),炮步甲能夠進(jìn)行連續(xù)噴射和精準(zhǔn)定位,改變刺激部位,它的腹部末端也會(huì)跟隨轉(zhuǎn)換噴射角度。例如,先刺激左中足,待它準(zhǔn)確噴射向左中足后,立即刺激右后足,它也能立即定位右后足進(jìn)行噴射,連續(xù)噴射并不影響定位準(zhǔn)確性。

2.2.噴射次數(shù)與噴射距離炮步甲體內(nèi)貯存的反應(yīng)物含量有限,因此它所能進(jìn)行的防御噴射次數(shù)也是有限的。將廣炮步甲固定,以鑷子進(jìn)行刺激。經(jīng)對(duì)20只廣炮步甲研究所得,在同樣強(qiáng)度的刺激下,立即噴射次數(shù)為3~5次。加強(qiáng)刺激和等待時(shí)間,刺激強(qiáng)度以不破壞炮步甲的身體為標(biāo)準(zhǔn),直到炮步甲不再噴射,可得炮步甲總共能噴射的次數(shù)約6~9次?？梢娕诓郊卓梢赃M(jìn)行連續(xù)噴射,但噴射次數(shù)多了以后,炮步甲需要用幾秒長(zhǎng)的時(shí)間來晃動(dòng)腹部以進(jìn)行噴射,無論是噴射時(shí)間還是精準(zhǔn)度與開始相比都有所偏差。以淀粉碘化鉀試紙鋪于蟲體下方,刺激噴射,可觀察到噴射距離。在盡量于蟲體正后方刺激,平直噴射,于紙上留下的痕跡在65mm左右,作為蟲體的最遠(yuǎn)噴射距離。

2.3.噴射脈沖炮步甲共進(jìn)化出兩個(gè)分支,brachinoid和paussoid,其中paussoid分支的炮步甲種類非常少見,其噴射過程中并沒有脈沖現(xiàn)象,另一類brachinoid包含了大多數(shù)種類的炮步甲[6],而廣炮步甲就屬于brachinoid分支。通過對(duì)炮步甲噴射的聲音進(jìn)行錄音,并以cooleditpro軟件進(jìn)行音頻處理,可見廣炮步甲的噴射確實(shí)有音頻脈沖。其噴射持續(xù)0.01～0.03s,如圖可知,0.002s左右即有一脈沖波,一次噴射有5～15次脈沖(圖2)。

3討論

國內(nèi)的炮步甲屬有三個(gè)常見的近緣種較難鑒別,分別是廣炮步甲、耶炮步甲和爪哇炮步甲,三者體表花色相近,大小類似,同樣都具有“噴射”行為,難以辨別。其中耶炮步甲身體花紋稍顯不同,而廣炮步甲和爪哇炮步甲目前可見鑒別方式只有雌雄生殖器。本文所采炮步甲皆取自河北省白洋淀,根據(jù)生殖器和分布范圍可以斷定是廣炮步甲(爪哇炮步甲主要分布在中國南部)。遂對(duì)其進(jìn)行詳細(xì)的形態(tài)描述予以補(bǔ)充便于分類。

本文對(duì)廣炮步甲的生活習(xí)性主要是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)觀察,其生活史可能與野外觀察有所出入,但大體上與爪哇炮步甲習(xí)性相類似,所以主要提出幾點(diǎn)關(guān)于習(xí)性的補(bǔ)充,尤其是關(guān)于廣炮步甲的食性跟前人研究的其他種有所出入,廣炮步甲偏向雜食,并且?guī)缀醪蝗∈郴铙w昆蟲,除活體黃粉蟲和死亡黃粉蟲對(duì)比之外,筆者還曾觀察到一只廣炮步甲因?yàn)楸凰輹r(shí)間過長(zhǎng),處于行動(dòng)非常困難的瀕死狀態(tài),卻在每當(dāng)有其他炮步甲靠近時(shí)強(qiáng)烈掙扎移動(dòng)身體或者推開其他炮步甲,直到它恢復(fù)活力不再有對(duì)其他同種的排斥行為,筆者懷疑是它怕其他炮步甲誤認(rèn)為自己已死取食自己身體所致。但在食物不充足的條件下,只提供活體昆蟲廣炮步甲是否會(huì)取食還需要進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。炮步甲屬的昆蟲以它們獨(dú)特的防御方式而著名。受“炮步甲”噴射毒液的啟發(fā),二戰(zhàn)期間,美國的軍事專家研制出一種二元化武器。對(duì)炮步甲的防御行為進(jìn)行研究,既有助于了解生物奧秘,又可能具有仿生學(xué)意義。世界關(guān)于炮步甲防御機(jī)制有些報(bào)道,但對(duì)于炮步甲具體的防御行為,如噴射最遠(yuǎn)距離和噴射次數(shù)等目前還未見,本文對(duì)此作了初步調(diào)查。

篇9

比較記憶法就是對(duì)相似而又不同的知識(shí)進(jìn)行對(duì)比分析，不論哪一種比較方式，都能達(dá)到同中求異、異中求同的目的。有比較才有鑒別，其特征、本質(zhì)就會(huì)得到凸現(xiàn)。

1．1橫向比較例如，基因重組和易位這一對(duì)概念的比較，都屬于可遺傳變異，前者發(fā)生在一對(duì)同源染色體的非姐妹染色單體之間的部分交叉互換，而易位發(fā)生在兩條非同源染色體之間的互換，屬于染色體的結(jié)構(gòu)變異。

1．2順序比較在學(xué)習(xí)新知識(shí)時(shí)，將其與頭腦中已有的舊知識(shí)加以比較。例如，在記憶動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件時(shí)，與之前學(xué)過的植物細(xì)胞與組織培養(yǎng)的條件相比較，除了找出動(dòng)植物細(xì)胞相同的培養(yǎng)條件外，還特別強(qiáng)調(diào)要控制一定的滲透壓和溶解氧，在培養(yǎng)液中要添加動(dòng)物血清。

2聯(lián)想記憶法

根據(jù)知識(shí)點(diǎn)的特征引導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行正確的思維，對(duì)不同的知識(shí)點(diǎn)賦予不同的聯(lián)想來加強(qiáng)記憶的方法。例如，由感冒時(shí)夜間咳嗽比白天嚴(yán)重，聯(lián)想到副交感神經(jīng)有使氣管收縮的功能;由寒冷季節(jié)人們排尿增多的現(xiàn)象聯(lián)想到人體內(nèi)水分的來源和去路，以及體內(nèi)滲透壓的調(diào)節(jié)。

3圖形再現(xiàn)法

俗話說，“一幅畫勝過千萬言”，由此說明圖形記憶的有效性。這是由于圖形具有鮮明的形象性、直觀性，容易引起記憶。例如，拓展教材中“甘油三酯的代謝過程”圖示，清晰呈現(xiàn)了甘油三酯的來源和代謝過程，其來源有外源性和內(nèi)源性兩種，前者是小腸上皮細(xì)胞吸收;后者是肝細(xì)胞和脂肪細(xì)胞的自身合成，去路是在肝細(xì)胞和脂肪細(xì)胞都能分解為甘油和脂肪酸再轉(zhuǎn)化成葡萄糖，然后被組織細(xì)胞的利用，還體現(xiàn)了甘油三酯的平衡受到胰島素、胰高血糖素和腎上腺素的調(diào)節(jié)機(jī)制。高三教材中還有很多知識(shí)點(diǎn)借助圖形進(jìn)行分析和記憶，是非常有效的。

4歸納記憶法

篇10

從2002年開始，我們結(jié)合我校人才培養(yǎng)目標(biāo)及具體情況，制定了本科生《分子生物學(xué)實(shí)踐》及《基因工程實(shí)踐》的教學(xué)大綱，開設(shè)了相應(yīng)獨(dú)立的實(shí)踐課程，設(shè)計(jì)了質(zhì)粒提取、PCR技術(shù)、DNA電泳、限制性內(nèi)切酶技術(shù)、DN段的膠回收、外源基因的連接及重組DNA的轉(zhuǎn)化、篩選和鑒定等最基本需要掌握的實(shí)踐。同時(shí)，我們還自編了內(nèi)容詳細(xì)、操作具體的實(shí)踐教材。從2002年第一次開課至今已經(jīng)過去了十多年，實(shí)踐課取得了一定的成績(jī)，根據(jù)課上學(xué)生上課情況和完成的實(shí)踐報(bào)告上看，學(xué)生反應(yīng)良好，能積極動(dòng)手動(dòng)腦并提出問題，實(shí)踐報(bào)告也完成得認(rèn)真、仔細(xì)。學(xué)生掌握了這些基本實(shí)踐的原理和操作，對(duì)將來從事中藥相關(guān)領(lǐng)域的研究工作有一定的幫助。但是在這十多年的教學(xué)實(shí)踐中，我們也發(fā)現(xiàn)了問題，由于該課程的實(shí)踐內(nèi)容全都是驗(yàn)證性實(shí)踐，實(shí)踐設(shè)計(jì)為“教師包辦型”，從試劑配制到操作步驟教師都已經(jīng)準(zhǔn)備好，學(xué)生只是按照規(guī)定的步驟按部就班地做實(shí)踐就行了，在這樣的教學(xué)模式下學(xué)生的行為受到限制，對(duì)教師和教材依賴性強(qiáng)，限制了發(fā)揮學(xué)生主動(dòng)思維的空間。

二、改革實(shí)踐教學(xué)內(nèi)容，強(qiáng)調(diào)綜合性和連貫性

由于驗(yàn)證性實(shí)踐限制了學(xué)生發(fā)揮主動(dòng)思維的空間，因此，必須建立分子生物學(xué)實(shí)踐教學(xué)創(chuàng)新培養(yǎng)新模式，從驗(yàn)證性實(shí)踐過渡到以設(shè)計(jì)性、綜合性實(shí)踐為主，重點(diǎn)培養(yǎng)學(xué)生在科研中的綜合思維能力及實(shí)際動(dòng)手操作能力，變被動(dòng)灌輸為主動(dòng)思考，為學(xué)生今后進(jìn)實(shí)踐室從事相關(guān)領(lǐng)域的科學(xué)研究做準(zhǔn)備。我們?cè)诟母镏袕?qiáng)調(diào)實(shí)踐的綜合性和連貫性，如學(xué)習(xí)重組DNA技術(shù)時(shí)，我們安排了5個(gè)實(shí)踐：重組質(zhì)粒的提取，DNA的酶切，DNA凝膠電泳及片斷的膠回收，外源基因的連接，重組DNA的轉(zhuǎn)化、篩選及鑒定。這五個(gè)實(shí)踐包括了重組DNA技術(shù)的五個(gè)核心內(nèi)容“分、切、接、轉(zhuǎn)、篩”。我們把這5個(gè)實(shí)踐串聯(lián)成一個(gè)綜合實(shí)踐，使其具有連貫性。每次實(shí)踐結(jié)束時(shí)的樣品正好是下次實(shí)踐的材料，這些實(shí)踐將變成一整套前后關(guān)聯(lián)的有機(jī)整體，一環(huán)扣一環(huán)，只有這5個(gè)實(shí)踐全部操作成功了，才能最后得到自己需要的克隆。這種綜合性實(shí)踐使學(xué)生在整個(gè)過程中面臨著挑戰(zhàn)，也使最終成功得到產(chǎn)物的學(xué)生有成就感；不僅能培養(yǎng)學(xué)生綜合實(shí)踐操作能力，還能培養(yǎng)學(xué)生團(tuán)結(jié)協(xié)作的精神和對(duì)科學(xué)研究的興趣。

三、開放型教學(xué)模式，提高教學(xué)質(zhì)量

在傳統(tǒng)的實(shí)踐課教學(xué)中，學(xué)生除了在規(guī)定的上課時(shí)間，機(jī)械地完成規(guī)定的實(shí)踐任務(wù)外，幾乎沒有機(jī)會(huì)進(jìn)入實(shí)踐室，學(xué)生的主觀能動(dòng)性得不到發(fā)揮。開放實(shí)踐室，為學(xué)有余力的學(xué)生提供更多時(shí)間和空間顯得很有必要的。但對(duì)于多數(shù)中醫(yī)院校來說，由于實(shí)踐室資源緊張，在開放方面一直實(shí)行得不夠。這次，我們嘗試對(duì)學(xué)生開放實(shí)踐室，鼓勵(lì)學(xué)有余力的學(xué)生進(jìn)入實(shí)踐室，開展相關(guān)的分子生物學(xué)實(shí)踐研究，取得了一些成績(jī)。我們首先在課堂上向?qū)W生介紹本課程組教師在課題研究中所用到分子生物學(xué)實(shí)踐技術(shù)。有不少學(xué)生對(duì)教師的科研課題感興趣，我們組織感興趣的學(xué)生，在業(yè)余時(shí)間來課題組和教師一起進(jìn)行了相關(guān)分子生物學(xué)的實(shí)踐研究。通過和研究生共同實(shí)踐，加強(qiáng)了理論課的知識(shí)。其次，我們組織學(xué)生利用所學(xué)到的分子生物學(xué)知識(shí)，以小組為單位，通過課下查閱資料，完成了科研小課題的實(shí)踐設(shè)計(jì)。學(xué)生在課堂上討論了他們?cè)O(shè)計(jì)的小課題，通過教師評(píng)價(jià)并與教師一起討論，調(diào)動(dòng)了學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，激發(fā)了學(xué)生活躍的思維，通過討論進(jìn)一步修正方案，使其更加完善。同時(shí)，教師利用業(yè)余時(shí)間，組織感興趣的學(xué)生進(jìn)行了正式實(shí)踐。最后，在課堂中，我們抽出15分鐘，讓做實(shí)踐的學(xué)生講了具體實(shí)踐的體會(huì)和出現(xiàn)的問題，與大家分享成功的快樂和失敗的經(jīng)驗(yàn)。學(xué)生聽得都非常認(rèn)真，討論得也很熱烈，大家都覺得這種實(shí)踐教學(xué)模式非常好，增長(zhǎng)了很多知識(shí)，如果時(shí)間允許，希望能多些這種實(shí)踐教學(xué)模式。