導語：如何才能寫好一篇經(jīng)典遺傳學和表觀遺傳學，這就需要搜集整理更多的資料和文獻，歡迎閱讀由公文云整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

1.巴氏小體案例在遺傳學教學中的應用

2.下一代測序技術(shù)在表觀遺傳學研究中的重要應用及進展

3.遺傳學教學中在細胞與分子水平上理解等位基因的顯性與隱性

4.果蠅唾腺多線染色體研究進展及其在遺傳學教學中的應用

5.以人類血型為遺傳學案例教學的思考與實踐

6.表觀遺傳學藥物的研究進展

7.表遺傳學幾個重要問題的述評

8.構(gòu)建優(yōu)質(zhì)教學體系,促進《遺傳學》精品教育

9.小鼠毛色遺傳的控制機制及其在遺傳學教學中的應用

10.肝癌發(fā)生的分子遺傳學和表遺傳學研究

11.景觀遺傳學原理及其在生境片斷化遺傳效應研究中的應用

12.以遺傳信息為主線的遺傳學教學架構(gòu)及與其他課程的銜接

13.認知過程中的表觀遺傳學機制

14.我國高校遺傳學教材的出版與使用現(xiàn)狀的調(diào)查

15.表觀遺傳學:生物細胞非編碼RNA調(diào)控的研究進展

16.表觀遺傳學視角下運動干預阿爾茨海默病的機制分析

17.遺傳學與基因組學整合課程探討

18.表觀遺傳學研究進展

19.癲癇表觀遺傳學研究進展

20.不僅僅是遺傳多樣性:植物保護遺傳學進展

21.利用文獻精讀教學新模式優(yōu)化遺傳學教學

22.2015年中國醫(yī)學遺傳學研究領(lǐng)域若干重要進展

23.發(fā)展行為遺傳學簡介

24.光遺傳學技術(shù)應用于動物行為學在神經(jīng)回路中的研究進展

25.表遺傳學推動新一輪遺傳學的發(fā)展

26.生物教育專業(yè)《遺傳學》教學改革的探索

27.糖尿病腎病遺傳學研究進展

28.腫瘤表觀遺傳學研究熱點的聚類分析

29.淺談高?！哆z傳學》課程教學改革與實踐

30.2015年中國微生物遺傳學研究領(lǐng)域若干重要進展

31.利用經(jīng)典文獻優(yōu)化《遺傳學》雙語教學

32.孟德爾豌豆基因克隆的研究進展及其在遺傳學教學中的應用

33.表觀遺傳學在肺癌診治中的研究進展

34.人格行為遺傳學研究的兩類取向

35.害蟲遺傳學控制策略與進展

36.表觀遺傳學及其應用研究進展

37.阿爾茲海默病的表觀遺傳學機制及相關(guān)藥物研究

38.胃癌遺傳學及表遺傳學研究進展

39.遺傳學在膽管細胞癌發(fā)展中的重要性

40.子癇前期表觀遺傳學研究進展

41.行為遺傳學:從宏觀到微觀的生命研究

42.遺傳學史在遺傳學教學中的作用

43.男性不育的遺傳學評估

44.表觀遺傳學與腫瘤干細胞

45.開放式教學在遺傳學實驗教學中的探索與實踐

46.表觀遺傳學調(diào)控與婦科腫瘤發(fā)生、演進及治療的研究進展

47.規(guī)律運動干預人類衰老過程的表觀遺傳學機制研究進展

48.表觀遺傳學及其在同卵雙生子研究中的新進展

49.分子群體遺傳學方法處理鯉形態(tài)學數(shù)據(jù)的適用性

50.番茄果重數(shù)量性狀基因的研究進展及在遺傳學教學中的應用 

51.遺傳學教學中遺傳學史及科學方法論的教育

52.景觀遺傳學:概念與方法

53.孤獨癥的遺傳學和神經(jīng)生物學研究進展

54.肺癌表觀遺傳學的研究進展

55.腫瘤的表觀遺傳學研究

56.遺傳學課程群的設(shè)置和思考

57.《遺傳學》課程的建設(shè)與優(yōu)化

58.表觀遺傳學在中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病中的研究進展

59.遺傳學實驗教學體系的改進

60.肝癌表觀遺傳學研究進展

61.保護生物學一新分支學科——保護遺傳學

62.表觀遺傳學在淋巴系統(tǒng)腫瘤研究中的新進展

63.大腸癌的表觀遺傳學研究進展

64.重視經(jīng)典遺傳學知識體系構(gòu)建和學生自學能力的培養(yǎng)

65.植物化學遺傳學:一種嶄新的植物遺傳學研究方法

66.關(guān)聯(lián)分析及其在植物遺傳學研究中的應用

67.表觀遺傳學及現(xiàn)代表觀遺傳生物醫(yī)藥技術(shù)的發(fā)展

68.三陰性乳腺癌與表觀遺傳學研究現(xiàn)狀

69.構(gòu)建培養(yǎng)新型醫(yī)學人才的醫(yī)學遺傳學課程體系改革

70.骨髓增生異常綜合征的遺傳學檢測研究進展

71.釘螺遺傳學及其生物學特性的研究進展

72.羞怯:來自行為遺傳學的觀點

73.遺傳學探究性實驗教學的思考及實踐

74.“教學、實踐、科研、臨床”四位一體的醫(yī)學遺傳學教學體系建設(shè)探索與實踐

75.國內(nèi)高校遺傳學教材發(fā)展研究

76.男性生殖遺傳學檢查專家共識

77.腫瘤表遺傳學研究的進展

78.創(chuàng)新性遺傳學大實驗對提高大學生綜合能力的研究

79.白內(nèi)障表觀遺傳學研究的現(xiàn)狀及進展

80.遺傳學研究性實驗教學模式探索與創(chuàng)新人才培養(yǎng)

81.表觀遺傳學在木本植物中的研究策略及應用

82.高通量測序技術(shù)結(jié)合正向遺傳學手段在基因定位研究中的應用

83.激發(fā)與培養(yǎng)學生學習遺傳學興趣的教學途徑

84.從表觀遺傳學開展復雜性疾病證候本質(zhì)的研究

85.藍藻分子遺傳學十年研究進展

86.建設(shè)遺傳學課件體系 提高多媒體教學質(zhì)量

87.表觀遺傳學與腫瘤

88.原發(fā)性肝癌的表觀遺傳學及其治療

89.青少年焦慮、抑郁與偏差行為的行為遺傳學研究

90.兒童孤獨癥的遺傳學研究進展

91.本科生遺傳學實驗教學的改革探討

92.與閉經(jīng)有關(guān)的遺傳學問題

93.多媒體教學在遺傳學“三點測驗”教學中的實踐

94.一個實用的群體遺傳學分析軟件包——GENEPOP3.1版

95.論從“腎為先天之本”到“中醫(yī)遺傳學”

96.《遺傳學》多媒體教材的編寫與實踐

97.肺癌的表觀遺傳學研究進展

98.無創(chuàng)性產(chǎn)前遺傳學檢測研究進展

篇2

由于遺傳學在生命科學中具有不可替代的重要作用，其教學方法、教學模式的探索和研究近些年倍受關(guān)注。近年來,研究性教學在各高等院校不斷地被提出，黑龍江八一農(nóng)墾大學生命科學學院也把研究性教學改革不斷地深入到各學科教學中去。作為遺傳學教師,筆者在教學過程中不斷地進行著研究性教學的實踐和思考。

研究性教學是在‘‘發(fā)現(xiàn)學習模式”和瑞士皮亞杰的“認知發(fā)展學說”的理論基礎(chǔ)上發(fā)展起來的，其認為學生學習的過程與科學家研究的過程在本質(zhì)上是一致的，強調(diào)將教學與研究結(jié)合作為大學教學的基本思想，注重提高學生發(fā)現(xiàn)問題、分析問題和解決問題的能力，對培養(yǎng)創(chuàng)新型人才非常重要。研究性教學模式的核心理念是以實踐中的真實問題為基礎(chǔ),將學生置于真實的情境中學習，培養(yǎng)學生的學習能力、創(chuàng)新能力和實踐中的動手能力，增強學生對工作的適應能力，使教學與研究相統(tǒng)一m。研究性教學是以學生為主體,以問題為核心（PBL)去獲取知識和應用知識的教學模式。研究性教學的內(nèi)涵主要包括:教師把研究的思想、方法和取得的新進展引入教學活動；教師以研究的形式組織教學活動,打破原有的完整的學科邏輯和機械的順序；學生積極參與研究之中，在研究中學習、成長，養(yǎng)成獨立思考的氣質(zhì)和批判。

筆者根據(jù)研究性教學的規(guī)律及遺傳學學科的特點,在教學過程中對以下幾方面的問題進行了探索和實踐。

1發(fā)揮學生的主動性和創(chuàng)造性，培養(yǎng)學生的思辨能力和獨立思考能力

黨的十指出，科技創(chuàng)新是提高社會生產(chǎn)力和綜合國力的戰(zhàn)略支撐,必須擺在國家發(fā)展全局的核心位置。要堅持走中國特色的自主創(chuàng)新道路,以全球視野謀劃和推動創(chuàng)新，提高原始創(chuàng)新、集成創(chuàng)新和引進消化吸收再創(chuàng)新的能力，更加注重協(xié)同創(chuàng)新。這一論述充分體現(xiàn)了科技創(chuàng)新在經(jīng)濟和社會發(fā)展中的重要地位,也為高等教育提出了未來人才培養(yǎng)的方向。大學作為本科生培養(yǎng)基地，肩負著培養(yǎng)有創(chuàng)新精神和實踐能力的高素質(zhì)人才的重大歷史使命。高校畢業(yè)生的質(zhì)量直接關(guān)系到一個國家科技人才的整體實力和水平,高校教師如何改革現(xiàn)有的教學方法和模式,培養(yǎng)具有學習能力、自我創(chuàng)新能力的大學生，是目前教育教學過程中亟待解決的問題。

研究性教學模式具有極強的實踐性。研究性教學模式特別注重教學與研究相結(jié)合，理論與實際相統(tǒng)一。研究性教學模式不只強調(diào)背誦、理解復述和模擬,而是注重培養(yǎng)學生的科學思維、自主意識、團隊協(xié)作精神和工作責任心,強調(diào)培養(yǎng)學生獲取與歸納整理信息的能力、分析解決問題的能力、展示成果與表述觀點的能力。創(chuàng)新能力的培養(yǎng)不可能僅依靠獲得知識,很大程度上還依賴于學生的直接經(jīng)驗的積累，因此切實加強研究性實踐教學,對提高學生的實踐能力是至關(guān)重要的。創(chuàng)新型人才的培養(yǎng)目標要求學生既要學會動手又要學會動腦；因此，教師在教學過程中要樹立研究性教學為主的教學觀,運用正確的教學法,積極探討、推動教學研究和改革,培養(yǎng)學生主動探求知識的主體精神,動手、動腦的能力和創(chuàng)造性思維及創(chuàng)造精神。研究性教學過程從討論問題開始,需要涉獵大量的資料,課程學習本身不僅在于學習知識，還在于掌握學習知識的方法。研究性教學以學生為主體的教學模式強調(diào)了學生在學習過程中的核心地位,教師只起引導、示范、鼓勵、輔導和監(jiān)控的作用，這種模式可以最大限度地調(diào)動學生學習的主動性和積極性,培養(yǎng)學生自主學習及獨立分析和解決問題的能力。在遺傳學的教學過程中可以采用問題式、討論式、互動式課堂教學,從而達到更好的教學效果，在客觀上具有一定的可行性。以學生為主體的教學模式關(guān)鍵在于課前的認真準備和教師在課堂上的靈活調(diào)控。

2專業(yè)知識教學和實驗技術(shù)教學相結(jié)合

遺傳學是一門在實驗基礎(chǔ)上發(fā)展起來的學科,尤其是現(xiàn)代遺傳學技術(shù)的突飛猛進發(fā)展和遺傳學知識的大量增加,都給學生的學習帶來了一定的難度。因此,遺傳學采用什么樣的授課方法才能使學生掌握基本知識,提高學生的創(chuàng)新能力一直倍受教育工作者的關(guān)注。一些遺傳學教師的教學經(jīng)驗表明，在遺傳學授課過程中，適當?shù)刂v授遺傳學研究的基本實驗技術(shù)和遺傳學研究材料的獲得方法對幫助學生理解遺傳學知識是非常重要的。例如，在介紹分子標記選擇輔助育種的研究進展時,對分子標記的定義、類型、發(fā)展和每種標記的用途進行講解,對遺傳學研究材料如重組自交系和近等基因系群體的構(gòu)建方法及其在基因定位和育種研究中的應用等知識進行回顧,大大增強了學生對專業(yè)知識的理解。在實驗技術(shù)的教學方面,應不斷地給學生介紹最新技術(shù)在遺傳學研究中的作用以及不同技術(shù)在某一研究領(lǐng)域的時效性3。在內(nèi)容上,盡量安排生動豐富且易于操作的實驗項目，增加一些設(shè)計性和綜合性的實驗項目，尤其是近期，隨著表觀遺傳學研究的日漸深入,適當?shù)卦黾釉摲矫娴膶嶒炚n程對幫助學生理解基于非基因序列改變所致基因表達水平變化,如DNA甲基化和染色質(zhì)構(gòu)象變化等表觀遺傳學對生物性狀的改變所起的作用，可以開展表觀遺傳抑制劑對細胞周期調(diào)控的分析及RNA干擾基因沉默的遺傳分析等實驗。

3為學生提供具有時效性、權(quán)威性和新穎性的閱讀材料

隨著遺傳學科的快速發(fā)展,研究領(lǐng)域不斷拓寬,新技術(shù)、新成果不斷涌現(xiàn),任何一部教材都難以跟上遺傳學快速發(fā)展的步伐，因此必須借助網(wǎng)絡等媒體實現(xiàn)知識的不斷更新。在教學過程中，教師可適當?shù)亟梃b〈(Science〉〉、《Nature》以及分子細胞生物學領(lǐng)域的一些國際權(quán)威雜志上的綜述性文章作為教學中的補充內(nèi)容,使學生在學習經(jīng)典遺傳學理論的同時，對分子遺傳學和現(xiàn)代遺傳學的發(fā)展有更深入的理解。如在研究癌癥的遺傳學基礎(chǔ)時發(fā)現(xiàn),一半以上癌癥的發(fā)生過程中伴有p53突變。p53在正常細胞中壽命短、含量低，與細胞周期控制、DNA修復、衰老、血管生成和細胞凋亡密切相關(guān)。當p53發(fā)生突變時,細胞逃脫正常細胞生長的限制,使突變從一代細胞傳到下一代細胞,這為癌癥的發(fā)育創(chuàng)造了條件。在給學生授課的過程中，跟蹤遺傳學的最新研究動態(tài)，如引入p53等遺傳學研究進展，可大大激發(fā)學生學習的積極性?。表觀遺傳學目前也是遺傳學重要的補充,如乙?；讣易搴腿旧w易位、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、基因沉默、細胞周期、細胞分化與增殖以及細胞凋亡相關(guān),從而對生物體的性狀產(chǎn)生了影響。而非編碼RNA不僅能對整個染色體進行活性調(diào)節(jié),也可對單個基因活性進行調(diào)節(jié)，它們對基因組的穩(wěn)定性、細胞分裂、個體發(fā)育都有重要的作用。在教學過程中，適量增加表觀遺傳學的知識,可以極大地豐富學生的知識量及對科技前沿知識的認識,為提高學生的科技創(chuàng)新能力奠定基礎(chǔ)。

4案例式和情境式教學相結(jié)合，激發(fā)學生內(nèi)在的學習動力

案例教學法（Casemedthodteaching,CMT)是根據(jù)教學目標和培養(yǎng)目標的要求,在學生掌握了有關(guān)的基礎(chǔ)知識和基本理論的基礎(chǔ)上,教師在教學過程中選擇典型案例并以恰當?shù)男问浇o學生展示,把學生帶入一個特定情境中，在教師的指引下由學生自己依靠其知識結(jié)構(gòu)和背景,在這種案例情境中發(fā)現(xiàn)、分析和解決問題，培養(yǎng)學生運用理論知識并形成技能技巧的一種教學方法5。案例教學法最大的特點就是模擬實踐經(jīng)驗,增強學生實踐的能力。遺傳學教師在注重理論知識講授的同時,要穿插與實際生活密切相關(guān)的大量案例,培養(yǎng)學生分析問題和動手實踐等能力。

在遺傳學教學過程中，注重教學內(nèi)容與人類生活及人類疾病相結(jié)合,加強學生對教學內(nèi)容的認識和遺傳知識的深化。在講授單基因遺傳病、多基因遺傳病和染色體病時,可與臨床中真實的遺傳病相聯(lián)系,如常見的單基因遺傳性疾病一白化病、苯丙酮尿癥、黑尿癥、先天性聾啞、高度近視，多基因遺傳性疾病一原發(fā)性高血壓、支氣管哮喘、冠心病、青少年型糖尿病、類風濕性關(guān)節(jié)炎、精神分裂癥、癲癇、先天性心臟病，染色體遺傳性疾病一“21三體”綜合征、貓叫綜合征等。針對這些疾病，巧妙設(shè)計引導式問題,囊括大綱要求的知識點，突出遺傳學的課程特色。在該模式下的教學過程中，學生不是被動地學、記憶和理解教師所教授的知識,而是在教師的指導下,將學生置于可以從不同角度看待事物的環(huán)境，問題情境便能夠吸引并維持他們的興趣，使他們積 極尋找解決問題的方法，創(chuàng)造性地得出結(jié)論,從而激發(fā)學生學習的內(nèi)在動力。

5加強遺傳學教師師資隊伍建設(shè)，為研究性教學提供人才保障

過去,很多高校過于注重結(jié)果性評價而忽視過程評價,無法對教師的研究性教學能力和學生的實踐能力作出公正而又科學的評價H。目前，黑龍江八一農(nóng)墾大學已經(jīng)非常重視研究性教學的實施,并為此做出很多努力和嘗試。遺傳學作為生命科學的重要課程,其教師隊伍的整體水平是制約教學效果的一個重要因素。沒有一支高水平的教師隊伍一切將成為空談。為了提高研究性教學水平,學校組織教師到優(yōu)秀研究性教學能手的課堂上聽課,通過學習其他課程的課堂教學方法、教學模式，為遺傳學更好地進行研究性教學提供了教學案例。此外,學校年輕的遺傳學教師可以通過培訓、進修等形式提高專業(yè)水平。最后，如果想成功地進行研究性教學，授課教師必須進行學科專業(yè)的科學研究。授課教師要隨時關(guān)注遺傳學領(lǐng)域的最新發(fā)展動向，將權(quán)威雜志中介紹這門學科研究的新概念、新發(fā)現(xiàn)、新思路和新方法的文獻綜述引入課堂。這些參考文獻學術(shù)水平高、內(nèi)容新、難度適中，開闊了學生的視野，對他們很有吸引力。教師只有通過科研,才能真正理解本學科教材的內(nèi)在聯(lián)系，把握住本學科的發(fā)展趨勢,及時吸納學科內(nèi)最新科研學術(shù)成果,適時地把學生引入本學科知識和科研的前沿,引導學生在科研實踐中增長才智、得到鍛煉，激發(fā)學生的創(chuàng)造欲望，通過科研、實驗等手段培養(yǎng)學生的創(chuàng)新能力。

篇3

[關(guān)鍵詞]表觀遺傳修飾；DNA甲基化；牙周??；炎癥；細胞因子

[中圖分類號]R 781.4[文獻標志碼]A[doi]10.3969/j.issn.1673-5749.2012.02.034

Association between epigenetic modification and periodontal diseasesLei Dan, Jiang Su, Wu Yafei, Zhao Lei.（Dept. of Periodontics, West China Hospital of Stomatology, Sichuan University, Chengdu 610041, China）

[Abstract]Periodontitis is a multifactorial infection characterized by inflammation and destruction of tooth supporting tissues, the main cause of tooth lost. The pathogenesis is complex. Not only the periodontal pathogens and its metabolites damage the tooth supporting tissues directly, but also trigger immune response. Cytokines are pro－ducted during the immune response. In recent years, some researches demonstrated that the expressing of cytokines gene was regulated by epigenetic modification. Owing to cytokines, epigenetic modification has something to do with the periodontitis. In this review, the epigenetic modification involved in periodontitis and research progress were discussed.

[Key words]epigenetic modification；DNA methylation；periodontitis；inflammation；cytokine

表觀遺傳學的概念與遺傳學相對，1942年，沃丁頓最早提出了“epigenetics”一詞，主要指研究基因型和表型之間的關(guān)系。1987年，霍利迪針對“epigenetics”給出更進一步的定義[1]，即現(xiàn)在比較統(tǒng)一的認識，他認為其是一門主要研究沒有DNA序列改變并且可以遺傳的基因功能變化的學科。表觀遺傳機制主要是通過調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄來調(diào)節(jié)基因的表達，表觀遺傳修飾包括DNA甲基化、組蛋白乙?；?、DNA乙?；⒒蛴∮?、基因沉默等[2]。本文就DNA甲基化和組蛋白乙?；c牙周病的相關(guān)性作一綜述。

1表觀遺傳學及相關(guān)概念

1.1DNA甲基化

DNA甲基化是指在DNA甲基轉(zhuǎn)移酶（DNA methyltransferases，DNMT）的作用下，催化S-腺苷甲硫氨酸作為甲基供體，將一個甲基基團添加到DNA分子中的堿基上。這種甲基基團的添加主要發(fā)生在DNA的轉(zhuǎn)錄啟動因子CpG島（基因組中富含CpG二核苷酸的一些區(qū)域）內(nèi)的胞嘧啶C5上的碳原子，形成5-甲基胞嘧啶[3]。DNA甲基化后，能直接干擾特異轉(zhuǎn)錄因子，如核因子-κB與啟動子的識別位置結(jié)合，甲基CpG結(jié)合蛋白與轉(zhuǎn)錄因子競爭性結(jié)合甲基化DNA位點，均可使轉(zhuǎn)錄因子與DNA分子的結(jié)合減少，因此DNA甲基化會抑制特定基因的轉(zhuǎn)錄過程。如果DNA未發(fā)生甲基化或者去甲基化后，特定轉(zhuǎn)錄因子與DNA分子的結(jié)合會恢復正?；蛘咴龆啵虼薉NA去甲基化能夠促進特定基因的轉(zhuǎn)錄過程[4]。

1.2染色體組蛋白修飾

組蛋白是染色質(zhì)基本結(jié)構(gòu)單位核小體的核心部分，外周被DNA纏繞。當組蛋白發(fā)生結(jié)構(gòu)改變，即發(fā)生組蛋白修飾時，常常會影響基因的轉(zhuǎn)錄和表達。目前，有關(guān)組蛋白修飾的研究多集中在組蛋白乙?；矫妗＝M蛋白乙?；墙M蛋白乙?；D(zhuǎn)移酶（histone acetyltransferase，HAT）將乙酰輔酶A的乙?；糠洲D(zhuǎn)移至組蛋白氨基末端上特定賴氨酸殘基的ε-氨基基團上。帶負電的乙?；税被鶊F的正電荷，此時DNA分子本身的負電荷使得DNA構(gòu)象展開、核小體結(jié)構(gòu)松弛。松弛的核小體結(jié)構(gòu)可促進轉(zhuǎn)錄因子與DNA分子的接觸，因此組蛋白乙?；せ盍颂囟ɑ虻霓D(zhuǎn)錄過程；當組蛋白去乙?；福╤istone deacetylase，HDAC）移去組蛋白賴氨酸殘基上的乙?；鶗r，組蛋白恢復正電性，增加了與DNA之間的吸引力，使啟動子不易接近轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件，從而反向抑制特定基因的轉(zhuǎn)錄[5]。

近年來，許多學者進行了表觀遺傳修飾的相關(guān)研究，大多涉及的均是腫瘤、癌癥、自身免疫性疾病等，對炎癥性疾病的研究較少。

2炎癥發(fā)生的分子機制

炎癥反應以免疫細胞的滲出為其重要特征，滲出的免疫細胞分泌的細胞因子與炎癥的發(fā)生發(fā)展緊密相關(guān)。免疫細胞主要包括T細胞、B細胞、單核吞噬細胞和樹突細胞等。T細胞是參與炎癥反應的重要免疫細胞，慢性炎癥炎灶部位出現(xiàn)大量激活的CD4+T輔助細胞（T helper，Th），識別并幫助CD8+Th細胞殺死外源病原菌。CD4+Th細胞還能分化為多種效應T細胞：Th1、Th2、Th17。

3表觀遺傳修飾對炎癥反應的調(diào)控

3.1Th1/Th2細胞的分化及其細胞因子

天然CD4+T細胞在抗原呈遞細胞信號作用下，分化為Th1或者Th2細胞，發(fā)揮不同的免疫功能。Th1細胞能夠調(diào)節(jié)細胞免疫，分泌干擾素（interferon，IFN）-γ、腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）-α、白細胞介素（interleukin，IL）-2等細胞因子抵抗細胞內(nèi)的細菌或病毒。Th2細胞介導體液免疫，分泌IL-4、IL-5、IL-13等細胞因子，抵抗胞外病原體[6]。

天然CD4+T分化為Th1和Th2細胞依賴于表觀遺傳修飾。包括各自特異性細胞因子基因的組蛋白乙?；虳NA甲基化等。Th1細胞的分化受ifn-γ基因DNA低甲基化及組蛋白3高乙?；蚑h2的特征細胞因子———il-4、il-5、il-13基因的表觀遺傳沉默的調(diào)控，而Th2細胞分化則受il-4、il-13基因的組蛋白3快速乙?；蚑h1特征細胞因子———ifn-γ基因的表觀遺傳沉默的調(diào)控[7]。

3.2Th17細胞分化及細胞因子

CD4+T除分化為Th1和Th2外，近年來發(fā)現(xiàn)了一種新的Th細胞亞群，即Th17細胞。Th17細胞分泌IL-17和IL-17F，具有較強的促炎性，在炎癥疾病中具有重要作用。與Th1、Th2的分化一樣，Th17的分化也受表觀遺傳修飾的調(diào)控，其特點為il-17基因啟動子區(qū)存在組蛋白乙酰化和甲基化現(xiàn)象[8]。

3.3CD8記憶性T細胞的分化及其細胞因子

CD4+T細胞與CD8+T細胞的激活密切相關(guān)。天然CD8+T細胞激活分化為CD8記憶性T細胞（CD8 memory T cells，CD8Tm）。CD8Tm能分泌促炎細胞因子，如IL-2、IFN-γ，參與炎癥反應。CD8+T分化為CD8Tm的過程中受表觀遺傳修飾的調(diào)控，其特點是細胞因子il-2和ifn-γ基因啟動子區(qū)DNA低甲基化和ifn-γ基因啟動和增強區(qū)的組蛋白乙?；痆9]。

綜上可知，炎癥反應中的免疫細胞在發(fā)揮定向分化功能的過程中，存在表觀遺傳修飾，與炎癥性疾病的發(fā)展密切相關(guān)[10]。

4表觀遺傳修飾與牙周病的調(diào)控

4.1對基因的調(diào)控

現(xiàn)在人們普遍認為，研究表觀遺傳現(xiàn)象的一個經(jīng)典模式就是雙胞胎。同卵雙生的2個人具有完全相同的基因組，在同樣的環(huán)境中長大后，他們在性格、健康方面仍會有較大的差異[11]。

在對雙胞胎牙周疾病的研究中，學者們發(fā)現(xiàn)其牙周病的表型往往有所不同。Torres de Heens等[12]在排除了教育程度、吸煙、病原菌等的影響，對同卵雙胞胎的牙周病表型進行研究后發(fā)現(xiàn)，同卵雙胞胎之間的附著喪失、牙槽骨吸收程度均不一致，且雙胞胎年齡越大，牙周病表型的差異性也越大。由此提示，表觀遺傳修飾可能參與了牙周病相關(guān)基因表達的調(diào)控。

X染色體上的基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子（tissue inhibitor of metallo proteinase，timp）-1基因表達產(chǎn)物TIMP-1是基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）的抑制因子，其可通過酪氨酸蛋白激酶和絲裂素活化蛋白激酶途徑促進破骨細胞的骨吸收作用；在高濃度時抑制MMP活化，在低濃度時反而促進MMP的活化。正常狀態(tài)下，女性2條X染色體中的一條處于甲基化修飾狀態(tài)時，此X染色體上的基因不表達[13]。國內(nèi)外學者均在女襲性牙周炎患者中發(fā)現(xiàn)，2條X染色體上的timp-1基因都處于去甲基化狀態(tài)時，才有活性表達，由此會引起TIMP-1生成增多，促進牙槽骨吸收。男性只有一條X染色體，由此提示，女襲性牙周炎的發(fā)病率高于男性可能與timp-1基因的表達有關(guān)[14]。

4.2牙周致病菌

牙齦卟啉單胞菌、伴放線放線桿菌是常見的牙周致病菌，檢出率高，致病作用確定。

牙齦卟啉單胞菌是檢出率最高的牙周致病菌，與牙周病密切相關(guān)。伴放線放線桿菌的致病性與其毒力因子密切相關(guān)，如菌毛和囊泡可介導其對宿主上皮細胞的黏附、侵入，毒素分泌等[15]。DNA腺嘌呤甲基轉(zhuǎn)移酶是DNA甲基化的關(guān)鍵酶，與革蘭陰性菌的生物功能相關(guān)，可調(diào)節(jié)毒力相關(guān)基因的表達。Wu等[16]在研究伴放線放線桿菌時發(fā)現(xiàn)，敲除dam基因的菌株和標準菌株與人口腔上皮癌細胞黏附后，缺乏株分泌的白細胞毒素是標準株的24倍。這可能是因為敲除dam基因后，伴放線放線桿菌白細胞毒素基因的DNA甲基化減少，呈低甲基化狀態(tài)，dam基因的表達增強導致的。但具體作用機制不明確，需進一步研究證明。

4.3調(diào)控牙周炎癥反應

4.3.1發(fā)病機制牙周病的始動因子是牙菌斑。菌斑微生物及其毒性產(chǎn)物引發(fā)并驅(qū)動炎癥反應，同時激活宿主的免疫細胞，產(chǎn)生并釋放多種細胞因子。IL、IFN、轉(zhuǎn)化生長因子-β、TNF、前列腺素E2等，能調(diào)節(jié)破骨細胞的分化，導致牙槽骨吸收。MMP可以直接破壞和降解膠原，還可以通過分泌細胞因子，降解結(jié)締組織，并使其降解持續(xù)和延長，是牙周組織破壞的最主要侵襲者。牙周炎發(fā)病過程中，涉及的細胞因子主要有IL-6、IL-8、IFN-γ、TNF-α、MMP等。

4.3.2調(diào)控牙周病相關(guān)細胞因子表觀遺傳修飾調(diào)控細胞因子基因的表達，DNA高甲基化和組蛋白去乙酰化可抑制細胞因子的表達，而DNA低甲基化和組蛋白乙酰化則能促進基因的表達。在牙周炎患者中，常常有多種細胞因子的表達增高。有研究[17-19]發(fā)現(xiàn)，細胞因子的分泌增多與其基因的表觀遺傳修飾存在相關(guān)性。慢性牙周炎患者的口腔上皮細胞中，ifn-γ、il-6、tnf-α基因啟動子區(qū)DNA常常處于低甲基化狀態(tài)，促進了相應的mRNA表達增多，分泌了IFN-γ、IL-6、TNF-α蛋白[20]。牙周炎活動期ptgs2基因啟動子DNA甲基化僅為靜止期的1/5，因此活動期PTGS2的表達較靜止期明顯增多。在侵襲性牙周炎和慢性牙周炎患者的口腔上皮細胞中，il-8基因啟動子區(qū)的低甲基化均明顯高于健康對照組。由此可見，表觀遺傳修飾的DNA甲基化能夠調(diào)控ifn-γ、il-6、tnf-α、ptgs2、il-8基因的轉(zhuǎn)錄，在牙周炎癥的發(fā)生發(fā)展中起一定的作用。

5小結(jié)和展望

表觀遺傳修飾的DNA高甲基化能抑制細胞因子基因的表達，反之則可促進其表達，此過程的調(diào)控依賴于DNA甲基轉(zhuǎn)移酶和組蛋白去乙?；?，以及它們的促進劑或抑制劑[21]。表觀遺傳修飾與牙周病的相關(guān)性尚處于探索階段，學者們在牙周炎癥組織中發(fā)現(xiàn)存在表觀遺傳修飾的改變，但其具體機制尚不明確，需進一步研究。

6參考文獻

[1]Holliday R. DNA methylation and epigenetic defects in carcinogenesis[J]. Mutat Res, 1987, 181（2）：215-217.

[2]Gomez RS, Dutra WO, Moreira PR. Epigenetics and periodontal disease：Future perspectives [J]. Inflamm Res, 2009, 58（10）：625-629.

[3]Offenbacher S, Barros SP, Beck JD. Rethinking periodontal inflammation[J]. J Periodontol, 2008, 79（8 Suppl）：1577-1584.

[4]Barros SP, Offenbacher S. Epigenetics：Connecting environment and genotype to phenotype and disease[J]. J Dent Res, 2009, 88（5）：400-408.

[5]Timmermann S, Lehrmann H, Polesskaya A, et al. Histone acetylation and disease[J]. Cell Mol Life Sci, 2001, 58（5/6）：728-736.

[6]Mosmann TR, Kobie JJ, Lee FE, et al. T helper cytokine patterns：Defined subsets, random expression, and external modulation[J]. Immunol Res, 2009, 45（2/3）：173-184.

[7]Lee GR, Kim ST, Spilianakis CG, et al. T helper cell differentiation：Regulation by cis elements and epigenetics[J]. Immunity, 2006, 24（4）：369-379.

[8]Akimzhanov AM, Yang XO, Dong C. Chromatin remodeling of interleukin-17（IL-17）-IL-17F cytokine gene locus during inflammatory helper T cell differentiation[J]. J Biol Chem, 2007, 282（9）：5969-5972.

[9]Northrop JK, Thomas RM, Wells AD, et al. Epigenetic remodeling of the IL-2 and IFN-gamma loci in memory CD8 T cells is influenced by CD4 T cells[J]. J Immunol, 2006, 177（2）：1062-1069.

[10]Wilson AG. Epigenetic regulation of gene expression in the inflammatory response and relevance to common diseases[J]. J Periodontol, 2008, 79（8 Suppl）：1514-1519.

[11]Fraga MF, Ballestar E, Paz MF, et al. Epigenetic differences arise during the lifetime of monozygotic twins[J]. Proc Natl Acad Sci U S A, 2005, 102（30）：10604-10609.

[12]Torres de Heens GL, Loos BG, van der Velden U. Monozygotic twins are discordant for chronic periodontitis：Clinical and bacteriological findings[J]. J Clin Periodontol, 2010, 37（2）：120-128.

[13]Anderson CL, Brown CJ. Epigenetic predisposition to expression of TIMP1 from the human inactive X chromosome[J]. BMC Genet, 2005, 6：48.

[14]趙紅宇,張旭,李得加,等.侵襲性牙周炎牙齦組織中TIMP1基因表達多態(tài)性研究[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志, 2005, 15（12）：1502-1503.

[15]Henderson B, Ward JM, Ready D. Aggregatibacter（Actinobacillus）actinomycetemcomitans：A triple A* periodontopathogen[J]. Periodontol 2000, 2010, 54（1）：78-105.

[16]Wu H, Lippmann JE, Oza JP, et al. Inactivation of DNA adenine methyltransferase alters virulence factors in Actinobacillus actinomycetemcomitans[J]. Oral Microbiol Immunol, 2006, 21（4）：238-244.

[17]Zhang S, Barros SP, Niculescu MD, et al. Alteration of PTGS2 promoter methylation in chronic periodontitis[J]. J Dent Res, 2010, 89（2）：133-137.

[18]Andia DC, de Oliveira NF, Casarin RC, et al. DNA methylation status of the IL8 gene promoter in aggressive periodontitis[J]. J Periodontol, 2010, 81（9）：1336-1341.

[19]Oliveira NF, Damm GR, Andia DC, et al. DNA methylation status of the IL8 gene promoter in oral cells of smokers and non-smokers with chronic periodontitis[J]. J Clin Periodontol, 2009, 36（9）：719-725.

篇4

關(guān)鍵詞：醫(yī)學分子生物學 實驗教學 教學改革 綜合性實驗

中圖分類號：G64 文獻標識碼：A 文章編號：1673-9795（2014）02（a）-0037-03

21世紀以來，隨著人類基因組計劃的完成，醫(yī)學分子生物學作為分子生物學的重要分支得以迅猛發(fā)展，其理論與技術(shù)早已廣泛滲透到生命科學的各領(lǐng)域，同時也成為橫跨基礎(chǔ)醫(yī)學與臨床醫(yī)學的橋梁課程。我校于2003年為醫(yī)學本科生開設(shè)了醫(yī)學分子生物學理論課的教學，實驗課的教學由于經(jīng)費、場地、儀器等因素的限制，僅針對檢驗專業(yè)學生開設(shè)，其教學任務由醫(yī)學基礎(chǔ)研究中心醫(yī)學分子生物學實驗室承擔。通過多年的教學實踐和摸索，我們在現(xiàn)有的條件和辦學特色定位下及實驗教學基礎(chǔ)上，針對檢驗專業(yè)本科生教育的特點，于2011年起，我們對醫(yī)學分子生物學實驗課教學改革進行了初步探索，以期促進本學科實驗教學工作的發(fā)展，達到提高教學質(zhì)量和培養(yǎng)學生綜合實踐能力的目的。

1 醫(yī)學分子生物學實驗教學的重要性

醫(yī)學分子生物學主要致力于闡明生物大分子結(jié)構(gòu)、功能、調(diào)控機制以及人體各種生理和病理狀態(tài)的分子機制[1]。這些內(nèi)容十分抽象而無直觀的實體，其中所涉及到的生理、生化過程，學生僅從書面上是無法進行形象化的觀察和認知。因此，作為一門實踐性和應用性很強的學科，實驗教學在醫(yī)學分子生物學整個教學過程中占有重要地位。通過實驗課的學習，不僅能驗證課堂上所學到的理論基礎(chǔ)，增強學生對知識的理解和掌控能力，而且能夠激發(fā)學生的學習興趣，培養(yǎng)學生發(fā)現(xiàn)問題、分析問題和解決問題的實際能力。

2 對醫(yī)科生全面推行醫(yī)學分子生物學實驗課教學的改革勢在必行

醫(yī)學分子生物學是生命科學發(fā)展中最重要的前沿學科之一，其發(fā)展依賴于反復的實驗驗證，故具有實驗性強的特點，分子生物學實驗技術(shù)正深刻地影響著醫(yī)學的各個分支領(lǐng)域。因此，對省屬醫(yī)學院校各專業(yè)的本科生來說，掌握分子生物學技術(shù)的基礎(chǔ)理論和基本的實驗方法非常重要。提高學生的動手能力、培養(yǎng)應用型人才，對廣大醫(yī)科本科學生、研究生和青年教師而言顯得越來越重要。培養(yǎng)應用型人才成為目前教育教學改革的趨勢[2]。因此，實驗課的教學內(nèi)容應該更加結(jié)合臨床實際，除了基本的分子生物學技術(shù)，注重增加醫(yī)學應用和前沿的內(nèi)容。

特別是從2012年起，國家對大學本科教育經(jīng)費的投入大幅度增加，體現(xiàn)了國家對高等教育的高度重視。大幅度提高對教育的投入，對于醫(yī)學生來說，主要體現(xiàn)在對教學成本高的實驗課教學的重視和投入，理論課教學的成本畢竟相對較低。因此，對醫(yī)學院校本科生進行醫(yī)學分子生物學實驗課教學改革，加強分子醫(yī)學教學，全面推行醫(yī)學分子生物學實驗課教學改革的時機成熟、勢在必行。

3 我校醫(yī)學分子生物學實驗教學中存在的問題

瀘州醫(yī)學院是培養(yǎng)醫(yī)學本科生最大的省屬地方醫(yī)學院校之一。學?，F(xiàn)有17個二級院系，在校全日制本?？茖W生、研究生、留學生15000余人（http：///html/xygk/xyjj/）。醫(yī)學基礎(chǔ)研究中心成立于1999年，通過十多年的發(fā)展，目前擁有多名高學歷、高職稱的專職教師、實驗技術(shù)人員及先進的實驗儀器和設(shè)備，建立了“醫(yī)學分子生物學”省高校重點實驗室，“腫瘤表觀遺傳學”省高校重點實驗室和“表觀遺傳與腫瘤”省醫(yī)學重點實驗室，形成了分子生物學、細胞生物學、腫瘤生物學、實驗動物模型、形態(tài)學等研究平臺，可開展蛋白質(zhì)組學、基因組學與個體化醫(yī)藥、表觀遺傳學等方面多學科交叉的科學研究工作，是我校一個重要的開放性實驗中心，為醫(yī)學分子生物學實驗教學提供了強大的師資隊伍力量和科研技術(shù)支持，但在實驗教學過程中仍存在諸多問題。

首先，實驗教學課時不足。眾所周知，醫(yī)學院校學生由于專業(yè)的特殊性所學課程繁多，各門課程的課時非常有限，就我校檢驗專業(yè)本科生而言，醫(yī)學分子生物學理論教學36學時，實驗教學18學時，理論與實驗的比例為2∶1。由于課時安排不充分，許多實驗項目無法開展，導致學生與許多醫(yī)學分子生物學的經(jīng)典實驗失之交臂。而教師為了完成教學任務，被迫加快教學進度，甚至為了節(jié)約時間，提前準備好實驗所用試劑，學生沒有親自動手的機會，無法真正達到實驗教學的效果。

其次，實驗教學經(jīng)費緊張。醫(yī)學分子生物學實驗項目多，所涉及的知識面廣泛，許多儀器和試劑都十分昂貴，需要大量的資金投入[3]。本中心作為全院重要的科研平臺和人才培養(yǎng)基地，擁有許多先進的儀器和設(shè)備，如基因擴增儀、各種電泳系統(tǒng)、各種離心機、凝膠成像系統(tǒng)、流式細胞儀等，但數(shù)量有限僅用于日?？蒲泄ぷ鞯拈_展，無法完全滿足實驗教學的需求，使得學生只能減少分組，不僅動手機會減少，而且實驗內(nèi)容選擇也受到限制。

最后，傳統(tǒng)的教學模式影響了教學質(zhì)量。長期以來，醫(yī)學分子生物學實驗教學模式都遵循著一個基本流程進行：教師簡單講解實驗目的和原理，學生按照實驗操作步驟進行實驗，學生觀察結(jié)果寫實驗報告。并且在實驗過程中，教師會提前將實驗結(jié)果告知學生，學生只需要驗證結(jié)果是否相符，完全沒有獨立思考的時間和空間，成了被動的接受者，時間一長，學生失去了學習的熱情，嚴重影響了教學質(zhì)量。

4 檢驗醫(yī)學專業(yè)的醫(yī)學分子生物學實驗教學改革探索

實驗教學的設(shè)計思想是通過有限數(shù)目的實驗，加上實驗原理與方法導論的講授，使學生從實驗技能和實驗理論上能全面掌握醫(yī)學分子生物學的整體實驗體系、基本技術(shù)和方法。通過實驗教學改革，特別是設(shè)計性、探索性和綜合性實驗的開展，一方面加深了對理論知識的理解和掌握；另一方面培養(yǎng)了學生的動手能力，獨立分析問題和解決問題的能力，以及創(chuàng)造性思維的能力，從而為今后從事富于創(chuàng)造性的實際工作奠定良好的基礎(chǔ)[4～5]。

（1）實驗教材改革。

盡管實驗教學學時有限，開展的實驗項目較少，但為了讓學生能全面了解醫(yī)學分子生物學這門學科所涉及的各方面知識，本中心組織了一批有經(jīng)驗的教師和實驗技術(shù)人員共同編寫了可供醫(yī)學本科生和研究生使用的《精編醫(yī)學分子生物學實驗指導》[2]，全書共分五章四十余個具體的實驗操作。按照實驗目的、原理、儀器材料、步驟及注意事項等結(jié)構(gòu)介紹每一項實驗技術(shù)。其內(nèi)容大致分為五部分，包括基本分子生物學實驗技術(shù)、基因操作技術(shù)、基因診斷技術(shù)、表觀遺傳學和蛋白質(zhì)分析技術(shù)、細胞培養(yǎng)與分析技術(shù)。該教材不僅保留了一些經(jīng)典的實驗內(nèi)容，如質(zhì)粒DNA的提取，大腸桿菌感受態(tài)細胞的制備等外，新增了關(guān)于臨床基因診斷以及形態(tài)學與功能學的實驗內(nèi)容。在具體實驗教學過程中，我們可以根據(jù)不同專業(yè)，不同層次靈活教學。該實驗指導既有原理又有實驗結(jié)果，圖文并茂、簡潔精煉。同時附有醫(yī)學分子生物學實驗課程簡介和醫(yī)學分子生物學教學大綱。這樣，我們保證了實驗課教學內(nèi)容的知識性、系統(tǒng)性和權(quán)威性。

（2）教學內(nèi)容改革。

由于教學學時和實驗條件的限制，原有的教學內(nèi)容僅開展了三個實驗項目，分別為動物外周血全血DNA的提取實驗、瓊脂糖凝膠電泳實驗和血清蛋白SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗。這些實驗雖然是醫(yī)學分子生物學基礎(chǔ)及經(jīng)典的實驗技術(shù)，重要性很強，但是它們之間相對獨立，關(guān)聯(lián)度不夠，缺乏實驗的連貫性和綜合性，且與臨床聯(lián)系不大，學生興趣缺乏。為了節(jié)約教學成本，實驗準備均由教師提前完成，學生只需提取樣品，最后電泳上樣，觀察實驗結(jié)果，完成實驗報告。因此，學生根本沒有充分的時間對整個實驗進行思考和探索，可能實驗做完，他們完全沒有理解這些實驗的目的和意義，只是照搬照抄，應敷了事，完全違背了設(shè)置實驗課的初衷，沒有達到鍛煉學生獨立思考，獨立操作的目的。

針對這些問題，為了培養(yǎng)學生的學習興趣，提高學生的動手能力和創(chuàng)新性思維，根據(jù)醫(yī)學檢驗專業(yè)的特點，我們創(chuàng)新性地重新設(shè)計了一個綜合性實驗――DNA指紋分析[2，6～8]（見圖1），包括人外周血DNA的提取、分光光度法（Nanodrop法）測定DNA的濃度和純度、以所提取的DNA為模板進行PCR擴增D1S80短串聯(lián)重復序列、瓊脂糖凝膠及聚苯稀酰胺凝膠電泳、DNA染色（EB染色和銀染）、凝膠成像系統(tǒng)下觀察結(jié)果和照相，最后進行分析[2]。

同時將學生分為4人一組，每4個組為一個班，每個班由兩位教師負責。學生之間相互抽取血樣進行DNA的提取，所有實驗步驟均由學生獨立操作完成，教師只是從旁協(xié)助和指導，盡量爭取每位學生都有動手的機會。這樣改革的優(yōu)點在于，我們將研究對象由模式動物轉(zhuǎn)化為人類自己，從核酸技術(shù)以及基因工程技術(shù)兩條主線展開，并且選用了基因診斷中的一個重要內(nèi)容―DNA指紋分析這個能引發(fā)學生興趣的內(nèi)容，使得整個實驗過程更加貼近臨床實踐，更能促進學生的積極性和參與度。而且實驗具有連續(xù)性和系統(tǒng)性，使學生對實驗內(nèi)容有了更深刻的認識，提高了學生的動手能力，鞏固了課堂教學所學的理論知識。

（3）教學方式改革。

我們摒棄了傳統(tǒng)的教學方式，不再是單一的教師講，學生聽的模式，而是結(jié)合PBL法、充分利用現(xiàn)代教學手段，巧妙運用計算機多媒體作為實驗教學的輔助工具，合理利用多媒體系統(tǒng)的音頻和視頻信息，在實驗課里將一些未開展的實驗項目自然生動的展現(xiàn)在學生面前，方便了學生學習，提高了學生的學習興趣，為學生今后的畢業(yè)實習及工作奠定良好的基礎(chǔ)。同時教師帶習學生數(shù)量相對減少，有更多時間與學生進行面對面交流和溝通，啟發(fā)學生發(fā)現(xiàn)問題、分析和解決問題，使學生由被動的接受者轉(zhuǎn)變?yōu)橹鲃訁⑴c者，培養(yǎng)學生的科研思維和創(chuàng)新能力。

（4）教學效果反饋。

為了了解實驗教學改革的效果，我們對參與實驗的同學進行了問卷調(diào)查（見表1）。調(diào)查表的內(nèi)容主要涉及實驗開設(shè)是否具有創(chuàng)新性，是否能提高學生的學習興趣和動手能力，對學生今后的工作是否有幫助等等。調(diào)查結(jié)果顯示，實驗教學改革后，學生對醫(yī)學分子生物學這門課程有了更深的認識和理解，而且學習積極性明顯增加，對知識掌握更加具有完整性和系統(tǒng)性，達到了培養(yǎng)學生科研素質(zhì)和創(chuàng)新思維、提高動手能力的目的。

5 結(jié)語

總之，經(jīng)過醫(yī)學分子生物學實驗教學的改革，其實驗內(nèi)容將理論基礎(chǔ)與臨床實踐完整地結(jié)合在一起，學生普遍反映教學效果良好，學習積極性明顯提高，實驗操作能力顯著增強。通過醫(yī)學分子生物學實驗教學激發(fā)了學生的潛在能力，培養(yǎng)了學生的創(chuàng)新思維，為學生今后從事科學研究和臨床工作打下了堅實的基礎(chǔ)。適應社會發(fā)展需要，由培養(yǎng)單一臨床技能型人才向培養(yǎng)具有臨床科研和動手能力強的復合型人才轉(zhuǎn)變。但本次改革仍有不足之處，學生普遍反映實驗教學學時不夠，以及實驗教學經(jīng)費不足，導致實驗項目相對較少。

參考文獻

[1] 藥立波.醫(yī)學分子生物學[M].3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2008.

[2] 傅俊江.精編醫(yī)學分子生物學實驗指導[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2012.

[3] 林家齊，李玲.深化高校實驗教學改革，促進創(chuàng)新人才培養(yǎng)[J].科技與管理， 2009，6：124-127.

[4] 高利臣，肖璐.分子生物學實驗教學改革的幾點思考[J].實驗室研究與探索， 2010，29（4）：99-102.

[5] 王繼紅，葉芳.醫(yī)學院校生物化學與分子生物學實驗教學改革[J].實驗室研究與探索，2011，30（7）：288-291.

[6] Kseler A，ztürk O，Atalay A. Allele frequency of VNTR locus D1S80 observed in Hb D-Los Angeles carrires[J].Molecular Biology Reports 2012，39（12）：10747.

篇5

關(guān)鍵詞：原鈣黏蛋白10；結(jié)構(gòu)特點；生物學功能；發(fā)病機制

中圖分類號：Q71 文獻標志碼：A 文章編號：1008-2409f2016103-0192-04

原鈣黏蛋白10（protocadherin 10，PCDH10）定位于人類4號染色體長臂2區(qū)8帶上，由5個外顯子組成，長約219個堿基對。是一種表達于細胞膜表面的鈣黏附蛋白，屬于原鈣黏蛋白家族中的一員。原鈣黏蛋白最早是Shintaro等在經(jīng)典鈣黏蛋白（cadherin，CDH）胞外結(jié)構(gòu)域重復系列的簡并引物PCR擴增鑒定CDH家族成員時意外發(fā)現(xiàn)，并稱之為PCDH，屬于CDH的一個亞群，主要在中樞神經(jīng)系統(tǒng)表達，具有黏附功能，還可參與神經(jīng)回路、突觸的形成及功能的維持等。

1 PCDH10的分類及結(jié)構(gòu)特點

CDH分Ⅰ型經(jīng)典的鈣黏附蛋白、Ⅱ型鈣黏蛋白、橋粒鈣黏蛋白和PCDH家族4個亞群，其中PCDH由成簇的PCDH家族及非成簇的PCDH家族組成，非成簇的PCDH家族分成兩個部分：PCDH δ及系統(tǒng)發(fā)生樹中散在的PCDH家族（PCDHs），其中PCDH10是非成簇的PCDH家族中的一員。其結(jié)構(gòu)域與經(jīng)典的CDH的EC結(jié)構(gòu)域明顯不同：CDH的EC區(qū)域由多個外顯子編碼，而PCDH的EC區(qū)域則是由單個大的外顯子編碼而成。CDH的EC域有5個CDH重復序列，而PCDH EC域的重復序列則多于5個。此外，CDH的CP區(qū)保守性高于PCDH。

2 PCDHl0分子生物學功能

CDH是一種鈣依賴性的細胞黏附分子，PCDH在CDH中是一種帶有親同種抗原結(jié)合活性的跨膜蛋白，主要在中樞神經(jīng)系統(tǒng)表達，參與胚胎中樞神經(jīng)發(fā)育、介導神經(jīng)突觸形成、細胞識別和神經(jīng)通路的形成，其表達有嚴格的種族特異性，且對同種抗原的細胞黏附具有親和性，在動物發(fā)育過程中受時間和空間順序調(diào)控。在PCDHs中，非簇集的PCDHs在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的表達研究最為深入。PCDH10蛋白在功能性神經(jīng)回路表達：如嗅覺系統(tǒng)、黑質(zhì)紋狀體投射系統(tǒng)、olivocerebellar投射系統(tǒng)及視覺投射系統(tǒng)，PCDH10缺乏時可出現(xiàn)小鼠紋狀體神經(jīng)元及丘腦皮層投射系統(tǒng)軸突回路缺陷現(xiàn)象。研究發(fā)現(xiàn)PCDHs是細胞間黏附功能的中介，絕大部分黏附蛋白超家族呈現(xiàn)鈣依賴性的親同種抗原的黏附性。雖然多數(shù)非成簇的PCDHs（PCDHl、PCDH7、PCDH8、PCDH10、PCDHs18、PCDH19）呈現(xiàn)親同種抗原的黏附性，PCDH10具有弱的親同種抗原作用，在細胞與細胞之間的黏附中起調(diào)節(jié)作用，還可在細胞間起信號傳導作用。研究發(fā)現(xiàn)，PCDH10與Nck-相關(guān)蛋白1（Nap1/WAVE1）相互作用形成PCDH10/Nap1/WAVE1復合體，調(diào)控肌動蛋白裝配和細胞遷移，但其調(diào)節(jié)肌動蛋白組裝的機制尚不清楚。

3 PCDH10與疾病

3.1 PCDH10與精神神經(jīng)系統(tǒng)疾病

原鈣黏蛋白簇的純合子缺失被認為與自閉癥這類認知損害相關(guān)。某些PCDHs成員可調(diào)節(jié)突觸的形態(tài)和功能，PCDHs的破壞可導致神經(jīng)元回路異常及隨后的認知功能損害，因此，包括PCDH10在內(nèi)的PCDHs對維持神經(jīng)元回路的正常功能及神經(jīng)元回路的發(fā)育有重要作用。

3.2 PCDH10與腫瘤

隨著對PCDH10基因認識的深入，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)PCDH家族在多種腫瘤中具有抑癌基因的功能。PCDH10基因在所有成年人正常組織中均可廣泛表達，但在多種腫瘤中表達沉默或降低。江曼等在研究PCDH10對子宮內(nèi)膜腺樣癌的研究中發(fā)現(xiàn)，PCDH10在子宮內(nèi)膜癌細胞系及子宮內(nèi)膜癌組織中表達沉默，而正常子宮內(nèi)膜組織中高表達。過表達PCDH10可明顯抑制子宮內(nèi)膜腺樣癌細胞系的增殖，誘導癌細胞早期凋亡，阻滯癌細胞于G1期。李穎等發(fā)現(xiàn)，過表達PCDH10可抑制多發(fā)性骨髓瘤細胞系的增殖，瘤細胞呈G1期的阻滯。多發(fā)性骨髓瘤患者的骨髓及細胞系中PCDH10低表達，77.27%的患者PCDH10呈甲基化狀態(tài)。Wang等研究PCDH10基因在宮頸癌中表達，發(fā)現(xiàn)約有4/5的宮頸浸潤癌細胞系存在PCDH10沉默，去甲基化治療可逆轉(zhuǎn)。在胃癌中PCDH10的CpG島甲基化情況與傳統(tǒng)的臨床分期（N分期及T分期）這3者對胃癌預后的比較研究中，將PCDH10的CpG（-115、-108、-13及+3）位點甲基化與N分期及T分期作為獨立預測胃癌患者生存率的預測指標，將這3者進行COX回歸比較分析，證明CpG（-115、-108、-13及+3）位點甲基化的AIC（赤池信息量）值及BIC（貝葉斯信息量）值比N分期及T分期的值更小，證明CDHl0的CpG（-115、-108、-13及+3）位點甲基化可考慮用于預測所有胃癌患者生存率的最佳指標。劉紹祖等發(fā)現(xiàn)前列腺癌細胞系中PCDH10基因甲基化，60%前列腺癌組織PCDH10基因甲基化，前列腺增生組織中未見PCDH10基因甲基化。前列腺癌病理分期越高，PCDH10 CpG島甲基化程度也越高，預后也越差。岳根全等發(fā)現(xiàn)，PCDH10基因在腎癌組織細胞中的甲基化程度較高，高分期的腎癌細胞PCDH10基因甲基化程度高，PCDH10基因的甲基化與腎癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。Bertrand等報道，PCDH10基因的過表達抑制胃癌細胞的增殖、克隆、遷移及侵襲等。發(fā)現(xiàn)癌旁無瘤上皮出現(xiàn)PCDH10甲基化的患者術(shù)后生存期明顯縮短，PCDH10甲基化狀態(tài)可以預測胃癌患者的生存期。

表觀遺傳學研究發(fā)現(xiàn)食道癌（13/16）、鼻咽癌（12/12）、乳腺癌（3/4）、結(jié)腸癌（5/5）、肺癌（2，5）、肝細胞癌（2/8）等均存在PCDH10啟動子甲基化，認為PCDH10啟動子甲基化可能是腫瘤發(fā)生的早期事件。

4 PCDH10表達調(diào)控

研究發(fā)現(xiàn)，大部分腫瘤細胞存在PCDH10啟動子CpG甲基化現(xiàn)象，且其甲基化程度與PCDH10表達沉默呈負相關(guān)，岳全根等研究表明，去甲基化后，PCDHIO表達抑制可逆轉(zhuǎn)，腎癌組織中PCDH10基因的甲基化隨病理級別的增加而增高，隨著病情的惡化而增加。腫瘤細胞的DNA甲基化是PCDH10在腫瘤中失活的主要機制，恢復PCDH10表達有可能成為治療某些腫瘤的方法。李珍等發(fā)現(xiàn)PCDH10能抑制多發(fā)性骨髓瘤細胞系的增殖，還可使抑制凋亡因子Bcl-2表達，上調(diào)凋亡相關(guān)因子P53和Fas表達，促進骨髓瘤KM3細胞凋亡。有學者報道，恢復PCDH10在胃癌細胞系中的表達，不僅可上調(diào)caspase8、Fas、Jun、HTATIP2和CDKN1A促凋亡基因，觸發(fā)凋亡的發(fā)生，還可增加FGFR2、CDKN1A抗增殖基因和HTATIP2侵襲/轉(zhuǎn)移抑制基因表達水平，抑制腫瘤的進展。

篇6

CVT是發(fā)生于顱內(nèi)靜脈或靜脈竇的一種少見的血栓形成疾病，發(fā)病率為5/（100萬·年），占所有卒中的近0.5%，有很大的地域變異性。在CT和MRI產(chǎn)生以前，認為CVT是一種感染性疾病，可引起雙側(cè)或交替的神經(jīng)缺損，伴有癲和昏迷者常引起死亡。CVT的診斷靠尸檢或有嚴重臨床表現(xiàn)者進行血管造影，CT和MRI的廣泛應用改變我們對這種疾病的了解，目前認為CVT是伴有各種臨床表現(xiàn)的非感染性疾病，一般預后良好，肝素治療能降低CVT的病死率，甚至在顱內(nèi)出血病例也可應用，總體病死率＜10%［1］。本文就CVT的發(fā)病原因、臨床表現(xiàn)、診斷和治療進展做一綜述。

1 病因和危險因素

1.1 病因 多種疾病可引起CVT，對其原因和危險因素的識別相當困難，大體包括：①醫(yī)學、手術(shù)和產(chǎn)科引起的深靜脈血栓形成。②遺傳性凝血酶原疾?。喝缈鼓溉狈Α⒌鞍證和蛋白S缺失、LeideⅤ因子突變和凝血酶原突變、亞甲基四氫葉酸還原酶基因突變引起的高同型半胱氨酸。③獲得性凝血酶原狀態(tài)疾?。喝缒I病綜合征、抗磷脂抗體、高同型半胱氨酸、妊娠、圍產(chǎn)期、脫水，尤其兒童嚴重脫水、癌癥、血漿Ⅷ和von Willebrand因子濃度升高。④感染：如中耳炎、乳突炎、鼻竇炎、腦膜炎和全身感染性疾病。⑤炎癥性疾?。喝缦到y(tǒng)性紅斑狼瘡、韋格納肉芽腫、郝伯二氏病、結(jié)腸炎癥疾病和白塞綜合征。⑥血液?。涸l(fā)和繼發(fā)性紅細胞增多癥、血小板增多癥、白血病、貧血（包括陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿）。⑦藥物，口服避孕藥，門冬酰胺酶等。⑧機械原因：創(chuàng)傷，頭外傷、竇靜脈和球靜脈損傷、頸靜脈插管、神經(jīng)外科手術(shù)和腰穿［2］。

1.2 危險因素 約44%CVT病人存在一種以上的病因和促發(fā)因素，22%病人有先天或遺傳性血栓形成傾向，除經(jīng)典的抗凝血酶Ⅲ、蛋白C、蛋白S缺乏和LeideⅤ因子或凝血酶原基因突變外，最近強調(diào)血漿Ⅷ因子和血漿von Willebrand因子濃度升高的作用，二者也與CVT危險因素增加有關(guān)。然而，von Willebrand因子濃度升高似乎部分是通過Ⅷ因子介導的，在凝血和纖溶系統(tǒng)發(fā)現(xiàn)新的基因多態(tài)性，提示蛋白C的前體CG單倍型與CVT沒有獨立的關(guān)系［3］。但是，這種多態(tài)性增加了Ⅱ因子G20210A突變的危險，從單突變的14.7%增加到聯(lián)合突變的19.8%。對有先天性血栓形成傾向和高同型半胱氨酸病人來說，應用雌激素治療時，蛋白C的前體CG單倍型的危險增加。在一項對77例病人的研究中，CVT與被活化的凝血酶纖維蛋白溶解抑制劑或蛋白Z基因之間沒有明顯關(guān)系，但這可能是統(tǒng)計能力不足的結(jié)果。以后可能會在凝血和纖溶系統(tǒng)發(fā)現(xiàn)CVT的新的遺傳危險因素。對先天性血栓形成傾向的CVT病人應進行系統(tǒng)檢查，目的是尋找存在先天性血栓形成傾向危險的與其他相關(guān)疾病的關(guān)系，更重要的是在家族成員中進行預防性篩查以便早期干預。

高同型半胱氨酸是CVT的一種獨立和明顯的危險因素，27%～43%病人和8%～10%群體表現(xiàn)有高同型半胱氨酸。一項研究發(fā)現(xiàn)，使用甲硫氨酸后同型半胱氨酸增加并發(fā)現(xiàn)與CVT明顯相關(guān)，但這種發(fā)現(xiàn)沒有被其他研究證實［4］。在亞甲基四氫葉酸還原酶基因C677T突變與CVT之間也沒有發(fā)現(xiàn)其獨立的相關(guān)性，問題是單獨用葉酸或合用維生素B12及維生素B6治療高同型半胱氨酸能否降低CVT的危險仍然沒有肯定的答案。

許多病例報道和少量系列研究最近發(fā)現(xiàn)其他原因與CVT有關(guān)，如自發(fā)性低顱壓、庫興綜合征、服用反應停、三苯氧胺、促紅細胞生成素以及高原、植物雌激素和頸部按摩等。此外，對未知原因的病例仍然常見，約占病例的15%，隨著醫(yī)學遺傳學和基因研究的進展，這種比例將有所下降。

2 臨床表現(xiàn)

2.1 發(fā)生機制 靜脈血栓形成常引起細胞中毒性和血管源性腦水腫，而這些很難鑒別，在多數(shù)病例常常是兩種機制并存。腦靜脈阻塞引起局部腦水腫和靜脈梗死，檢查發(fā)現(xiàn)靜脈腫脹、水腫、缺血性神經(jīng)元損害和點狀出血，可合并為大的血腫。局部缺血引起細胞中毒性水腫，細胞膜依賴能量的泵受損，引起細胞內(nèi)腫脹。血腦屏障破壞和血漿進入組織間隙引起血管源性水腫，但這是一種可逆現(xiàn)象，如能成功治療靜脈阻塞，水腫可緩解［5］。

主要靜脈竇阻塞引起腦脊液吸收障礙導致顱內(nèi)壓升高，但由于缺乏壓力梯度，很少發(fā)生腦室擴張和腦積水。腦靜脈血栓形成有多種臨床表現(xiàn)，與許多其他神經(jīng)疾病表現(xiàn)類似，常引起誤診和延誤治療。

2.2 頭痛 頭痛是CVT最常見的癥狀，但機制仍然不明，可能的機制是阻塞的靜脈竇壁內(nèi)神經(jīng)纖維受累和局部炎癥引起，由靜脈竇周圍血塊對照增強掃描的證據(jù)提示。以前有頭痛病史者發(fā)生CVT時幾乎都有頭痛，多數(shù)伴有其他神經(jīng)癥狀的病人入院時常有頭痛的主訴或者在發(fā)病數(shù)天、數(shù)周前出現(xiàn)過少見類型的頭痛。頭痛可發(fā)生在單純顱內(nèi)高壓的情況下，有慢性或遲發(fā)性臨床表現(xiàn)的病人可有視盤水腫，但在急性病例少見［6］。

頭痛也可以是唯一癥狀而不伴有顱內(nèi)高壓、蛛網(wǎng)膜下腔出血或腦膜炎，成為孤立性頭痛。有時表現(xiàn)為霹靂樣痛，與SAH表現(xiàn)類似，CT和腦脊液檢查可以正常，臨床上有時很難做出診斷，而放射學家傾向于CVT的診斷。一般見于橫竇血栓形成。目前多數(shù)主張對孤立性頭痛應用肝素治療，但存在的問題是，不用肝素時CVT能否自行恢復，或者能否引起擴大并引起臨床惡化，仍是懸而未決的問題。因此，頭痛幾乎總是CVT首發(fā)癥狀，臨床醫(yī)生主要是認識CVT，甚至在孤立性頭痛病例開始給予肝素治療。

2.3 局灶性神經(jīng)功能缺失和癲發(fā)作 CVT病人由于卒中（靜脈缺血或腦內(nèi)出血）或水腫引起局灶性神經(jīng)缺失，與TIA的表現(xiàn)類似。有時容易診斷，因為預先存在非常見頭痛或病情傾向于已知的CVT的高度危險，如圍產(chǎn)期。有時在對TIA或卒中進行常規(guī)MRI或CT掃描時能獲得診斷。腦實質(zhì)損害的病人，臨床表現(xiàn)重，包括昏迷、運動缺失、失語和癲發(fā)作（局灶性或全身性癲發(fā)作，包括癲持續(xù)狀態(tài)），在腦實質(zhì)損害中，以矢狀竇和皮層靜脈血栓形成時癲發(fā)作常見［6］。

2.4 其他臨床表現(xiàn) CVT病人有許多其他臨床表現(xiàn)，如伴先兆的偏頭痛發(fā)作、單純精神障礙、波動性耳鳴、單個或多個顱神經(jīng)受累及蛛網(wǎng)膜下腔出血等。

不同靜脈或靜脈竇血栓形成可引起不同的臨床表現(xiàn)，枕靜脈血栓形成引起運動或感覺缺失，癲發(fā)作或二者兼有。矢狀竇阻塞引起運動缺失，雙側(cè)或交替出現(xiàn)，常伴癲發(fā)作，極少引起單純顱內(nèi)高壓綜合征。橫竇阻塞一般表現(xiàn)單純顱內(nèi)高壓，左側(cè)橫竇阻塞常伴有失語。大腦深靜脈阻塞臨床表現(xiàn)重，昏迷，精神錯亂和雙側(cè)運動缺失。多個靜脈竇阻塞時，最主要的臨床表現(xiàn)是眼眶疼痛、結(jié)膜水腫、眼球突出和眼球運動麻痹。早期特異性表現(xiàn) 多見65歲以上人群，常見意識損害和精神障礙而很少有良性顱內(nèi)壓增高。腦靜脈血栓形成是意識損害和精神障礙的原因，是老年發(fā)病的常見原因。此外，老年CVT時癌癥的發(fā)生較年輕病人多見。

3 CVT的診斷

3.1 神經(jīng)影像 診斷的關(guān)鍵是影像學檢查發(fā)現(xiàn)阻塞血管有血栓形成，磁共振靜脈造影（MRV）能發(fā)現(xiàn)不顯影的血管。在急性血栓形成超早期，由于流動假象使MRI受到限制，可引起假陽性和T1、T2加權(quán)像缺乏高密度信號。在發(fā)病最初3～5d，血栓形成的靜脈竇在T1加權(quán)像表現(xiàn)等密度信號，T2加權(quán)像表現(xiàn)高密度信號，很難與正常靜脈相區(qū)別。MRV與其他血管造影技術(shù)一樣，受到一定限制，因在阻塞或發(fā)育不良的靜脈竇，尤其是橫竇之間不能做出明顯的區(qū)別，甚至聯(lián)合應用MRI和MRV，診斷仍有一定困難，尤其是孤立的皮層靜脈血栓形成。如果非對照增強的CT或MRI不能發(fā)現(xiàn)特征性的癥狀，有時仍然需要常規(guī)血管造影［8］。

某些研究發(fā)現(xiàn)血栓形成時低密度受磁靈敏度的影響，與顱內(nèi)出血信號相似。在最初MRI掃描時，CVT部位90%表現(xiàn)為T2低密度，84%為T1高密度。T2序列的顯著敏感性的主要在最初3d，T2序列的低信號高于90%，而T1序列的高信號僅為70%。

而在皮層靜脈血栓形成部位，甚至在MRV沒有發(fā)現(xiàn)阻塞的情況下，應用T2序列（97%）比T1序列(78%)易于檢出液體衰減反轉(zhuǎn)恢復(FLAIR)， 3種序列檢出病例的比例分別是97%，78%和40%。雖然MRI序列（T1、T2、FLAIR或T2加權(quán)）沒有100%敏感性和特異性，但他們與MRV結(jié)合能提高診斷率，因此，對能進行MRI的病人并非總要進行血管造影。

3.2 MRI和彌散加權(quán)成像（DWI） 腦成像對診斷CVT常顯示非特異性損害，如出血、梗死、水腫、單純出血、梗死或混合型，甚至在30%病人可顯示正常。有報道DWI的改變包括的范圍較廣，有各種類型的異常報道，但缺乏大樣本的系列和非選擇性的病例研究。最常見的類型是混雜信號密度伴有正?；虮碛^彌散系數(shù)（ADC）增加，符合血管源性腦水腫。僅有1項研究證實ADC在多數(shù)病人降低，提示細胞中毒性腦水腫。最少見的類型是完全恢復時彌散減少，在大多數(shù)伴有癲發(fā)作病人T2加權(quán)像無腦實質(zhì)損害，DWI和ADC與動脈梗死有不同類型，主要提示血管源性腦水腫，少數(shù)為細胞中毒性腦水腫，這種不同解釋了為什么靜脈梗死有時比動脈梗死預良好［9］。

3.3 D二聚體檢測 由于CVT癥狀表現(xiàn)不一，在診斷上有一定兼容性，非侵入性、廉價、方便的檢查能在急診科完成。某些研究檢測D二聚體濃度，因為在下肢深靜脈血栓形成病人D二聚體低于500ng/ml有較高的陰性預測值，實際上，最近發(fā)生CVT的大多數(shù)病人D二聚體濃度均升高，提示D二聚體較低不可能做出CVT的診斷。然而，對D二聚體濃度較低而伴有腦部癥狀的病人，應例行頭顱MRI檢查。對最近發(fā)生孤立性頭痛病人，D二聚體檢查陰性也不能排除CVT，但不將D二聚體作為常規(guī)的篩查性檢查［10］。

4 治療

4.1 急性期治療 歐洲神經(jīng)協(xié)會聯(lián)合會（ENSC）關(guān)于CVT的治療指南已經(jīng)公布，急性期主要是肝素治療和其他血管再通程序。肝素治療CVT的目的是：①防止血栓進展；②對凝血酶原疾病的基本治療；③預防機體其他部位靜脈血栓形成或預防肺栓塞；④預防CVT復發(fā)。但對應用肝素存在爭議，認為肝素使靜脈梗死的自然傾向成為出血。指南規(guī)定，對抗凝無禁忌證者：①根據(jù)體重皮下注射低分子量肝素全程治療或靜脈滴注肝素進行劑量調(diào)整（活化部分凝血酶原時間大于正常值的2倍）。②局部靜脈溶栓。③機械取栓［11］。

有3項小樣本隨機臨床試驗對肝素治療CVT的安全性和效果進行檢驗，德國的試驗將靜脈應用未分級肝素與安慰劑比較，顯示肝素具有的明顯益處。荷蘭對60例病人應用固定劑量的低分子肝素與安慰劑的作用進行比較，2組之間沒有明顯的統(tǒng)計學意義。印度對57例女性經(jīng)MRI或血管造影診斷為產(chǎn)褥期竇靜脈血栓形成病人，靜脈使用未分級肝素與安慰劑的效果進行比較，顯示抗凝治療比安慰劑有明顯的益處。3項試驗的Meta分析顯示肝素治療死亡或殘疾的相對危險明顯降低。目前多數(shù)神經(jīng)學家認為在診斷確立后盡可能早的使用肝素治療，甚至在有出血性梗塞的情況下也可應用［12］。

對CVT溶栓治療的系統(tǒng)回顧沒有提供支持性證據(jù)，包括全身或局部溶栓。可能的偏見是作者對試驗結(jié)果差很少報道或者是這類文章被雜志編輯拒絕，不是盲性的治療評估導致對試驗結(jié)果評價的偏見。1項研究報道，13例CVT病人給予局部溶栓治療，6個月時結(jié)果是5例死亡和5例病人生活不能自理。

4.2 癥狀性治療 ENSC指南對CVT的癥狀性治療包括抗癲治療和顱內(nèi)高壓治療2個方面。急性期抗癲藥物適用于急性癲發(fā)作病人、有局部腦實質(zhì)損害和局部神經(jīng)缺失病人。癲預防適用有急性癲發(fā)作和局部出血性損傷的病人。顱內(nèi)高壓治療對視覺損害者考慮腰穿（如果無腦實質(zhì)損害）、口服乙酰唑胺和手術(shù)治療（腰部脊髓腔腹腔分流術(shù)，腦室腹腔分流，視神經(jīng)減壓）。意識障礙或腦疝給予滲透性療法、鎮(zhèn)靜或過度通氣及偏側(cè)顱骨切除術(shù)治療［11］。

癥狀性治療沒有進行醫(yī)學循證，單純顱內(nèi)高壓病人在肝素治療前發(fā)生視水腫可能威脅視力時，需腰穿排出腦脊液，頭痛和視力很快改善。在顱內(nèi)壓嚴重升高時，其他推薦的方法是抬高床頭，使用甘油和甘露醇治療以及鎮(zhèn)靜劑、過度換氣和監(jiān)測顱內(nèi)壓，沒有應用類固醇的指征，甚至在腦實質(zhì)損害的病人也不推薦使用。在繼發(fā)于同側(cè)半球損傷的腦疝病人，給予去骨瓣減壓有時能獲得較好的功能恢復。

癲發(fā)作的病人應接受抗癲藥物治療，因為他們有新發(fā)癲的高度危險。相反，病人遲發(fā)性癲的危險較高，急性期癲的發(fā)生較低。

4.3 長期治療

4.3.1 口服抗凝藥物:急性期后，應用口服抗凝藥代替肝素，目的是預防CVT的復發(fā)，防止其他靜脈的血栓形成和肺栓塞。CVT復發(fā)少見而且很難證實，尤其在第1次CVT后沒有進行MRA進行隨訪的情況下；其他血栓形成事件如深靜脈血栓形成和肺栓塞占病人的5%，隨著循證醫(yī)學證據(jù)增加，推薦深靜脈血栓形成病人口服抗凝藥物6～12個月，使國際標準比值（INR）介于2～3之間，對遺傳性或獲得性血栓形成傾向的病人，包括抗磷脂抗體者需要口服抗凝藥物的時間更長。

4.3.2 抗癲藥物:CVT病人有11%發(fā)生癲，在急性期有癲發(fā)作或有出血性腦實質(zhì)損害的病人最可能發(fā)生。對這些病人應給予抗癲藥物以預防癲復發(fā)，但最佳的持續(xù)治療時間不清楚。CVT病人嚴重視力喪失罕見，視神經(jīng)開窗用于緩解壓力或預防視神經(jīng)萎縮。雖然CVT病人整體預后良好，但近50%的存活者表現(xiàn)抑郁或焦慮，輕度認知缺失可影響病人回歸到從前的日?；顒铀?。妊娠和圍產(chǎn)期是CVT重要的危險因素，對有CVT的女性以后妊娠的危險已在5項中研究進行評估，共有855例CVT女性參與， 88%妊娠者進入正常分娩，其他誘發(fā)或自發(fā)性流產(chǎn)，沒有CVT復發(fā)，僅有2例發(fā)生深靜脈血栓形成，因此，對CVT，甚至與妊娠有關(guān)的CVT也不應該禁止懷孕，對分娩后推薦給予預防性抗凝血藥物，但沒有可應用的循證醫(yī)學的證據(jù)［13］。

5 結(jié)果

最近對CVT回顧性資料的Meta分析發(fā)現(xiàn)，15%的CVT病人死亡或生活不能自理。30d死亡的相關(guān)因素是意識損害、心理障礙、深靜脈血栓形成、右側(cè)半球出血和后顱凹損傷，急性死亡的主要原因是小腦幕切跡疝、繼發(fā)于大的出血性損傷、多部位損傷或彌漫性腦水腫。其他急性死亡的原因包括癲持續(xù)狀態(tài)、醫(yī)學并發(fā)癥和肺栓塞。23%的病人入院后發(fā)生病情加重，精神狀態(tài)惡化或局部缺失或新發(fā)癥狀如癲發(fā)作，急性期后病死率明顯與原發(fā)疾病有關(guān)，如癌癥等。

長期預后不良的危險因素是CNS感染、癌癥、深靜脈血栓形成、顱內(nèi)出血、入院時格拉斯哥昏迷分級評分＜9分，精神疾病、年齡＞37歲或男性病人。這些預測因素證實為獨立相關(guān)，但研究結(jié)果沒有公布。整體結(jié)果明顯好于動脈卒中，近2/3病人恢復良好沒有后遺癥。但在老年癌癥患者預后較差，隨訪終結(jié)后49%病人死亡或生活不能自理，因這些病人血栓形成事件的危險增加，對這些病人需要抗凝治療6個月以上。

在伴有顱內(nèi)出血的亞組病人，有大腦深靜脈或者右側(cè)竇血栓形成伴有運動缺失的老年男性，6個月時死亡或生活不能自理的危險增加，這些病人成為新的治療策略的靶向。